[发明专利]一种基于脂肪酸检测的动物源性饲料原料鉴别方法

说明书

技术领域

本发明属于动物源性饲料的鉴别领域，特别涉及一种基于脂肪酸检测的不同种属动物源性蛋白饲料的鉴别分析方法。

背景技术

近年来，“疯牛病”事件对欧盟乃至世界范围的畜牧业、公共安全、饲料工业和畜产品国际贸易均带来了巨大冲击，严重威胁动物和人类健康的同时，也造成了巨大的经济损失。为了从源头上切断疯牛病的传播途径，世界各国纷纷制定法律、法规限制或禁用肉骨粉等动物源性饲料的使用。但是由于蛋白质饲料资源匮乏，加之利益的驱使，非法进口、制假售假和违禁添加等违规使用动物源性饲料的行为屡禁不止，这不仅严重扰乱市场秩序，侵害消费者的利益，也造成了很大的疯牛病隐患。

要满足饲料质量安全监管需求，确保相关法律法规的有效实施，科学可靠的检测技术和方法是重要的保障。而为了更好地实施饲料产业的可持续发展和循环利用，逐步细化至不同种属之间是否相互饲用是动物源性饲料禁用法律法规的必然发展趋势，这也对不同种属动物源性饲料的鉴别技术提出更高的要求。目前，国际范围内用于官方仲裁的动物源性饲料检测标准方法主要为显微镜分析法和聚合酶链反应法，这两种方法虽然可以进行不同种属动物源性成分的鉴别分析，但均存在一定的局限性，单一使用难以满足高效准确的种属鉴别分析要求。

发明内容

针对本领域存在的问题，本发明的目的是提供一种基于脂肪酸检测的不同种属动物源性饲料原料的鉴别分析方法。

本发明所述的动物源性饲料原料包括陆生动物肉骨粉、陆生动物肉粉、陆生动物骨粉和鱼粉等蛋白饲料。当前市场上动物源性饲料多为单一种属动物制成，本发明也是针对多种不同的单一种属动物制成的动物源性饲料进行鉴别分析。

实现本发明目的的技术方案为：

一种基于脂肪酸检测的动物源性饲料原料鉴别方法，包括以下步骤：

1）已知来源的不同种属动物源性饲料样本收集与制备；

2）2-24个碳原子数的常见脂肪酸测定；

3）确定脂肪酸检出与未检出信息基础数据；

4）依据步骤3）中确定的脂肪酸检出与未检出信息数据，建立不同种属动物源性饲料判别分析模型；

5）评价步骤4）所建立的判别分析模型；

6）确定待测动物源性饲料样品中脂肪酸检出与未检出信息数据，输入步骤4）中所建立的判别分析模型进行种属鉴别分析。

其中，所述步骤1）还包括对所收集与制备的已知来源的不同种属动物源性饲料进行旋风磨粉碎，然后过1.0mm筛。

优选地，在步骤2）中，采用索氏提取法提取脂质样品，采用气相色谱法测定2-24个碳原子数的常见37种脂肪酸。

其中，所述步骤3）中脂肪酸的检出与未检出信息数据确定方式为将某种脂肪酸检出定义为“1”，未检出定义为“0”。

其中，所述步骤4）中，采用回归法和留一法交互验证，建立不同种属动物源性饲料偏最小二乘判别分析模型。

其中，所述步骤5）中，采用识别率Sensitivity和拒绝率Specificity两个指标对判别模型进行评价，Sensitivity和Specificity越接近于1，判别模型精度越高。

Sensitivity=PA/（PA+ND）  （1）

Specificity=NA/（PD+NA）  （2）

式中：PA为判别阳性样品数,ND为判别假阴性样品数，NA为判别阴性样品数，PD为判别假阳性样品数。

优选地，所述识别率Sensitivity和拒绝率Specificity为0.85-1.0时，所述判别分析模型有效。

其中，在步骤6）中采用索氏提取法提取待测动物源性饲料脂质样品，气相色谱法测定2-24个碳原子数的常见37种脂肪酸，并通过将脂肪酸检出定义为“1”，未检出定义为“0”确定待测动物源性饲料样品中不同种类脂肪酸的检出与未检出信息数据，输入步骤4）中所建立的判别分析模型进行种属鉴别分析。

本发明的优良效果在于：

1）本发明采用常规索氏提取法进行脂质样品提取，采用气相色谱经典方法进行2-24个碳原子数的常见37种脂肪酸的测定，可常规准确获取不同种属动物源性饲料的脂肪酸检测结果。

2）本发明通过将某种脂肪酸检出定义为“1”，未检出定义为“0”的方式，确定脂肪酸的检出与未检出信息基础数据，可直观并显著体现不同种属动物源性饲料中脂肪酸的组成差异特性。