[发明专利]一种竹笋中多酚的提取和检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术，具体地说是涉及一种竹笋中多酚的提取和检测方法。

背景技术

多酚是植物中具有促进人体健康功效的化合物；存在于一些常见的植物性食物中，如可可豆，茶，大豆，红酒，蔬菜和水果。多酚类物质具有很强的抗氧化作用。氧化损伤是导致许多慢性病，如心血管病，癌症和衰老的重要原因。多酚的抗氧化功能可以对这些慢性病起到预防作用。比如巧克力中的多酚是很强的抗氧化剂，它可以抑制低密度脂蛋白（LDL）胆固醇氧化。多酚除了具有抗氧化作用外，据2008年1月FEDERATION of AMERICAN SOCIETIES for EXPERIMENTAL BIOLOGY(FASEB)杂志报道，以色列研究人员首次发现在进食高脂食物的同时摄入多酚可以减轻高脂食物对人体健康的威胁，这说明多酚可以有效预防高脂食物在人体代谢过程中所产生的衍生物，如自由基的危害性。

尽管多酚广泛存在于植物性食物中，但是它在不同植物中的活性成分物质及其结构、含量有很大差异。而且，植物中多酚的含量受诸多因素影响，如品种、加工过程及储存条件等。

竹笋为禾本科竹亚科植物的嫩苗，又称竹萌、竹芽。据分析，生笋富含蛋白质、氨基酸、脂肪、糖类、钙、磷、铁、胡萝卜素和维生素B1、维生素B2、维生素C等成分。除了富含多种营养物质，竹笋还有较高的药用价值。中医认为，竹笋味甘、部分品种微苦，性寒，能化痰下气，清热除烦，通利二便；《名医别录》认为竹笋“主消渴，利水道，益气，可久食”;《本草纲目拾遗》指出竹笋“利九窍，通血脉，化痰涎，消食胀”，尤其善于清化热痰。目前，关于竹笋保健效用的开发研究尚属空白；同时我们在多次的研究中发现另一种重要的植物保健物质——黄酮在竹笋中含量很低，用常规检测方法几乎检测不出含量，因此推测多酚很可能是竹笋中的主要保健物质。此外，关于竹笋多酚的提取、检测方法也缺乏系统研究报道。所以，我们对竹笋多酚的提取和检测方法进行了详细的研究，为竹笋的开发利用提供理论依据。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对现有技术中关于竹笋多酚的检测方法缺乏系统研究，提供一种竹笋中多酚的提取和检测方法，该方法提取效率高，检测方便。本发明的目的在于：优化并建立检测新鲜竹笋中多酚含量的体系，以及提取竹笋中多酚的体系。

相比较于现有的竹笋多酚提取方法，本发明中竹笋的保存、处理及提取过程均在低温进行，可以有效保护多酚中活性物质；并且直接采用丙酮作为提取溶剂可有效提高多酚提取效率；之外，超声波的利用可以进一步提高提取效率。

为实现本发明的目的，本发明采用的技术方案如下：

一种竹笋中多酚的提取和检测方法，该方法的步骤为：

（1）备料：选取新鲜竹笋，液氮冷冻后敲碎、将笋肉混合于-70℃保存，备用；

（2）超声波辅助有机溶剂低温提取竹笋中多酚：提取时，取出一定量竹笋置于研钵中，加入液氮研碎，选取丙酮作提取溶剂，向竹笋中加入丙酮，样品充分匀浆后收集到离心管中，于10℃以下低温超声提取15～60min，离心取上清，即得竹笋多酚提取液；

（3）竹笋中多酚的检测：

Folin-ciocalteu法检测：新鲜竹笋中多酚检测体系为：多酚提取液0.25mL、水1.75mL、稀释6倍的Folin-ciocalteu显色剂1mL、5%～15%Na₂CO₃1mL；

检测条件：反应温度：水浴20～35℃，反应时间：0.5～3.5h，检测波长：755nm～770nm。

进一步，步骤（2）中，选取30%丙酮作提取溶剂，按1g竹笋加入5～30mL30%丙酮，样品充分匀浆后收集到50mL离心管中，于10℃以下低温超声提取15～60min，离心取上清，即得竹笋多酚提取液。

进一步，按1g竹笋优选加入10mL30%丙酮进行提取。

进一步，超声提取频率为40kHz，超声功率150W，提取时间为45min。

进一步，步骤（3）中，Folin-ciocalteu法检测：新鲜竹笋中多酚检测体系为：多酚提取液0.25mL、水1.75mL、稀释6倍的Folin-ciocalteu显色剂1mL、15%Na₂CO₃1mL；

检测条件：反应温度：水浴25℃，反应时间：1.5h，检测波长：755nm。

本发明具有以下优点：