[发明专利]贞芪扶正制剂中多糖的含量测定方法

权利要求书

1.一种贞芪扶正制剂中多糖的含量测定方法，其特征在于：以无水葡萄糖为对照品，采用苯酚-硫酸法在480～490nm波长处或采用蒽酮-硫酸法在600～625nm波长处测定贞芪扶正制剂中多糖的含量。

2.根据权利要求1所述的贞芪扶正制剂中多糖的含量测定方法，其特征在于，所述方法具体包括以下步骤：

（1）对照品溶液的制备：取无水葡萄糖对照品适量，精密称定，加水制成1mL含0.1mg的溶液，即得；

（2）供试品溶液的制备，采用下述方法a-d中的任一种：

a精密称取贞芪扶正制剂或其内容物2.0g，精密加入水50mL，称定重量，超声、回流30～60min或微波提取5～15min，补足重量，滤过；精密量取续滤液25mL，滤液加入95%乙醇使含醇量达80%，过滤，沉淀物用95%乙醇进行洗涤，沉淀物挥干，加水溶解并转移至25mL容量瓶内，超声10～30min，定容至刻度，摇匀，即得；

b精密称取贞芪扶正制剂或其内容物2.0g，精密加入水50mL，称定重量，超声、回流30～60min或微波提取5～15min，补足重量；3000～5000rpm离心3min，取上清液，即得；

c精密称取贞芪扶正制剂或其内容物6.0g，置250mL烧瓶中依次用60～90℃的石油醚、乙醚和90%乙醇索氏提取，残渣挥干，精密加入水150mL，称定重量，超声、回流30～60min或微波提取5～15min，补足重量，滤过；精密量取续滤液100mL，加入活性炭，脱色，过滤，精密量取续滤液50mL，加入95%乙醇使溶液含醇80%，静置过夜，过滤，沉淀物用无水乙醇反复洗涤，沉淀物挥干，加水溶解后定容到50mL容量瓶中，摇匀，即得；

d精密称取贞芪扶正制剂或其内容物4.0g，置250mL烧瓶中，依次用60～90℃的石油醚、乙醚和乙醇索氏提取，残渣挥干，精密加入水100mL，称定重量，超声、回流30～60min或微波提取5～15min，补足重量，滤过；精密量取续滤液50mL，加入95%乙醇使溶液含醇量达80%，静置过夜，滤过，沉淀物用无水乙醇反复洗涤，沉淀物挥干，用水50mL溶解，加入适量2mol/L盐酸调节pH至3.0，放置过夜，3000～5000rpm离心3min，取上清液，用2mol/L NaOH调pH至7.0，蒸干溶剂，残渣加水溶解后定容到50mL容量瓶中，摇匀，即得；

（3）标准曲线的绘制：精密吸取对照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL于具塞试管中，并分别补蒸馏水至10.0mL，摇匀，配成系列标准溶液；精密移取1.0mL系列标准溶液于10mL具塞刻度试管中，依次向试管中加入5%苯酚试剂1.0mL或2%蒽酮试剂0.5mL以及5.0mL浓硫酸，以蒸馏水1.0mL同法作空白参照，照《中国药典》2010版一部附录VA的紫外-可见分光光度法，苯酚-硫酸法在480～490nm波长处测定吸光度，蒽酮-硫酸法在600～625nm波长处测定吸光度，以吸光度值A为纵坐标、对照品溶液的浓度C为横坐标绘制标准曲线，得回归方程；

（4）测定法：精密吸取供试品溶液1.0mL置于具塞刻度试管中，依次向试管中加入5%苯酚试剂1.0mL或2%蒽酮试剂0.5mL以及5.0mL浓硫酸，照标准曲线绘制项下的方法测定吸光度，代入回归方程，计算贞芪扶正制剂中的多糖含量。

3.根据权利要求2所述的贞芪扶正制剂中多糖的含量测定方法，其特征在于，5%苯酚试剂的制备方法为：取苯酚适量，加铝片0.1g和碳酸氢钠0.05g，蒸馏，收集180℃馏份，称取7.5g，加水150mL溶解，置棕色瓶内放冰箱备用。

4.根据权利要求2或3所述的贞芪扶正制剂中多糖的含量测定方法，其特征在于，采用苯酚-硫酸法时，步骤（3）为：精密吸取对照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL于具塞试管中，并分别补蒸馏水至10.0mL，配成系列标准溶液；精密移取1.0mL系列标准溶液于10mL具塞刻度试管中，加入5%苯酚试剂1.0mL，摇匀，精密加入5.0mL浓硫酸，立即摇匀，室温下放置25min，以蒸馏水1.0mL同法作空白参照，照《中国药典》2010版一部附录VA的紫外-可见分光光度法，于490nm波长处测定吸光度，以吸光度A为纵坐标、浓度C为横坐标绘制标准曲线，得回归方程。