[发明专利]贞芪扶正制剂中齐墩果酸的含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种贞芪扶正制剂中齐墩果酸的含量测定方法，属于中药技术领域。

背景技术

贞芪制剂具有补气养阴、扶正固本之功效。现代药理实验证明贞芪制剂能提高人体免疫功能，保护骨髓和肾上腺皮质，促进干扰素产生；此外，还可以配合肿瘤患者放、化疗使用，减轻病人放、化疗期间的毒副作用，促进正常功能的恢复。贞芪制剂的处方由黄芪和女贞子组成。发明专利200310122216.7公开的《贞芪扶正药制备方法改进》可将药材女贞子中的齐墩果酸等有效成分充分提出。

贞芪制剂中所包含的齐墩果酸（OLA）可以对抗可的松所致的小鼠胸腺、脾脏萎缩，升高抗体IgG含量；可以降低豚鼠血清补体总量，抑制大鼠、小鼠同种被动皮肤过敏反应。另外，齐墩果酸还具有促进淋巴细胞增殖及迟发超敏的效应，并与IL-2具有协同作用。齐墩果酸对四氯化碳引起的实验性大鼠急性肝损伤也有明显的保护作用，可使血清中的谷丙转氨酶明显下降，使肝内甘油三酯蓄积量减少，使肝细胞变性，坏死明显下降，糖原蓄积增加，对实验性主动脉脂质斑块的形成及冠状动脉粥样，从而对实验性肝损伤有抑制作用和治疗作用。临床上可用于治疗病毒性肝炎、慢性活动性肝炎和预防肝硬变。此外，OLA还可抑制老龄小鼠由胶原及ADP诱导的血小板的聚集作用。用齐墩果酸配合维生素A、维生素B，在退黄和降酶等方面作用显著。最后，齐墩果酸还能够阻断组胺的释放，对前列腺素环加阳酶有激活作用，可使正常小鼠肺、肾脏器的环一磷腺昔(CAMP)含量明显高；OLA对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠杆菌、弗氏痢疾杆菌、伤寒杆菌，特别是对伤寒杆菌、金黄色葡萄球菌作用比氯霉素强。体外试验还证明OLA还具有明显的抗病毒作用。因此，对贞芪扶正制剂中齐墩果酸的含量进行测定显得尤为重要，是衡量药品有效性的一个关键指标。

专利号为200710077983.9、名称为《一种用于久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控方法》的专利中公开了一种贞芪扶正制剂中齐墩果酸的鉴别方法，但是其并未公开如何对贞芪扶正制剂中的齐墩果酸进行含量测定，因而并不能形成一套严格可靠的质量检测标准。如果没有严格的质量标准，得到的产品不能确保其质量，结果必将影响该药物的临床疗效；所以为提高贞芪扶正药物的治疗作用，确保用药的安全、有效及产品质量的稳定，制定一个严格可靠的质量标准成为保证药品质量的基本要求。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种贞芪扶正制剂中齐墩果酸的含量测定方法，它可以有效解决现有技术中存在的问题，实现对贞芪扶正制剂中齐墩果酸成分的含量进行快速、准确、高重现性、高回收率的测定。

本发明所述的贞芪扶正制剂按照发明专利200310122216.7所述的方法制备。

为解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案：贞芪扶正制剂中齐墩果酸的含量测定方法，以齐墩果酸对照品为对照，采用高效液相色谱法在200～220nm波长处测定贞芪扶正制剂中齐墩果酸的含量。

具体的，以齐墩果酸对照品为对照，以甲醇或乙腈∶水或0.01%～5%磷酸水溶液或0.01%～5%冰醋酸或0.01%～0.5%甲酸水溶液=60～95∶40～5为流动相，采用高效液相色谱法在200～220nm波长处测定贞芪扶正制剂中齐墩果酸的含量。

更具体的含量测定方法为：

（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇或乙腈∶水或0.01%～5%磷酸水溶液或0.01%～5%冰醋酸或0.01%～0.5%甲酸水溶液=60～95∶40～5为流动相；流速0.5～1.5mL·min^-1；检测波长200～220nm；柱温20～40℃；理论板数以齐墩果酸峰计算应不低于1000；

（2）对照品溶液的制备：取齐墩果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成1mg/mL的齐墩果酸对照品溶液；

（3）供试品溶液的制备：精密称取贞芪扶正制剂或其内容物14g，精密加入甲醇100mL，称定重量，超声或回流提取30～60min，或者，微波提取2～10min，用甲醇补足重量，过滤；取续滤液，即为供试品溶液；

（4）测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各15μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

前述方法中，所述检测波长优选为215nm。

前述方法中，所述的流动相优选为乙腈∶水或0.05%磷酸水溶液或0.5%冰醋酸或0.2%甲酸水溶液=85∶15。

更优选的流动相为乙腈∶0.05%磷酸水溶液=85∶15。