[发明专利]小粒径纳米颗粒的制备方法及纳米颗粒药物载体

说明书

技术领域

本发明涉及纳米药物领域，具体涉及一种小粒径纳米颗粒的制备方法，以及由此制得的纳米颗粒药物载体。

背景技术

胰腺癌、膀胱癌等癌症的致密瘤一直是癌症治疗的难题。在纳米抗癌药物的研究中，使用纳米载体包载抗肿瘤药物制备成纳米药物，并利用载体自身的代谢特点将药物输送到肿瘤部位，从而实现对肿瘤的高效治疗。以聚合物、脂质体或脂-聚合物为原料的纳米载体因具有生物相容性好、高效包载和传输药物与基因等优势被广泛应用于临床研究。

然而常规的纳米抗癌药物多存在生物安全性低的问题，且因粒径过大（通常大于100nm）和生物相容性差等原因，无法在致密瘤中有效富集，因此疗效甚微。无法用于活体实验或抑制这类肿瘤的生长和复发。

通过改善纳米药物的理化性质（粒径、表面电荷、化学修饰等）可以改善纳米抗癌药物在致密瘤中的有效富集，并因此实现对此类肿瘤的有效抑制。Chauhan等通过肿瘤血管模拟实验，证明了粒径小于40nm的纳米颗粒能够最快的透过肿瘤血管，但粒径过小或过大都会使降低颗粒在肿瘤组织中的累积量；Cabral等设计了30nm、50nm、70nm和100nm四种粒径大小的聚合物纳米胶束，并证明小于50nm的小粒径纳米胶束具有更好的肿瘤穿透能力和治疗效果。因此需要设计一种简易的、粒径在30～50nm之间的小粒径纳米颗粒，解决现有技术中的问题，并用于致密瘤的药物治疗研究。

发明内容

本发明旨在提供一种表面带负电的小粒径纳米药物载体，以及制备这种纳米药物载体的方法。

本发明包括一种小粒径纳米颗粒的制备方法，包括步骤：配制溶液：PLGA溶于乙腈中；卵磷脂、DSPE-PEG分别溶于乙醇水溶液中；磷脂成膜：混合卵磷脂溶液与DSPE-PEG溶液，超声混匀，并去除溶剂，以形成磷脂膜；纳米沉淀自组装：将PLGA溶液加入成膜的容器中，混合后，在60-65℃保温，以使PLGA与磷脂纳米沉淀自组装成纳米颗粒；以及超滤收集：超滤离心收集得到的纳米颗粒。

一些实施例中，磷脂成膜步骤中，混合溶液中包含相等质量的卵磷脂与DSPE-PEG。

一些实施例中，磷脂成膜步骤包括将卵磷脂溶液和DSPE-PEG溶液与乙醇水溶液混合，并超声混合的操作。

一些实施例中，纳米沉淀自组装步骤中的保温时间可以为2-3小时。

一些实施例中，纳米沉淀自组装步骤中，PLGA与总磷脂的质量比可以为3-5：1。

一些实施例中，纳米沉淀自组装步骤包括先将PLGA溶液与乙醇水溶液混合，再加入成膜的容器中的操作。

一些实施例中，超滤收集步骤中，使用10kDa的超滤膜收集纳米颗粒。

本法另一方面提供根据以上方法制备得到的纳米颗粒药物载体，该纳米颗粒药物载体的平均粒径可以为30-50nm，并且表面带负电，其表面电位可以为-30至-60mV。

本发明通过两步磷脂成膜及纳米沉淀两步法合成纳米颗粒药物载体，制备方法简便。可以获得粒径在30-50nm范围的小粒径纳米颗粒，肿瘤穿透性强。纳米颗粒表面带负电，在生物体中具有更高的循环稳定性。本发明制备得到的纳米颗粒可以作为药物载体，包载多种疏水性、亲水性和两亲性药物，应用广泛。

附图说明

图1为根据本发明的方法合成的小粒径纳米颗粒的TEM图。

图2为根据本发明的方法合成的纳米颗粒的粒度分析结果。

具体实施方式

为了克服现有纳米颗粒（NPs）药物载体因粒径过大、生物相容性差，而造成的在致密瘤中富集性差，进而导致疗效差的问题，本发明设计了一种小粒径纳米颗粒的简单制备方法，以提供一种包载多种药物的，用于纳米药物治疗致密肿瘤的载体平台。

本发明制备小粒径纳米颗粒的方法使用聚乙交酯丙交酯（PLGA）和磷脂作为主要原料，制备形成磷脂包裹的PLGA纳米颗粒。通过磷脂成膜、纳米沉淀自组装的两步法合成小粒径NPs。

具体地，本发明的制备方法主要包括四个步骤：配制溶液、磷脂成膜、纳米沉淀自组装，以及超滤收集。应理解，尽管以下按照该顺序描述这些步骤，这些步骤的具体顺序不限于此，例如不必须首先配制全部溶液，还可以仅在磷脂成膜、纳米沉淀自组装步骤之前配制该步骤中要使用的溶液。