[发明专利]一种检测牛奶中卡那霉素的样本前处理方法及使用其的检测方法

权利要求书

1.一种检测牛奶中卡那霉素的样本前处理方法，其特征在于，包括：

取待测牛奶样品，加入磷酸水溶液振荡提取8至10分钟，再加入三氯乙酸水溶液，混合30秒后离心，取所述离心后的上清液经滤纸过滤，得到滤液；

将所述滤液用混合型阳离子交换固相萃取柱净化，得到净化液；以及

将所述净化液在40℃水浴中氮气吹干，再加入定溶液，涡旋溶解后经0.22μm水系滤膜过滤，得到待测液；所述定溶液的配制方法为：取4毫升甲酸，用0.01摩尔/升的庚烷磺酸钠水溶液定容至100毫升。

2.如权利要求1所述的检测牛奶中卡那霉素的样本前处理方法，其中，所述磷酸水溶液中磷酸的体积分数为5%，处理每克所述待测牛奶样品需要所述磷酸水溶液的量为3.75毫升。

3.如权利要求1所述的检测牛奶中卡那霉素的样本前处理方法，其中，所述三氯乙酸水溶液中三氯乙酸的浓度为1克/毫升，处理每克所述待测牛奶样品需要所述三氯乙酸水溶液的量为0.375毫升。

4.如权利要求1所述的检测牛奶中卡那霉素的样本前处理方法，其中，所述离心的转速为4000至5000转/分钟，离心时长为8至10分钟。

5.如权利要求1所述的检测牛奶中卡那霉素的样本前处理方法，其中，所述净化的步骤为：将所述滤液加入已活化的混合型阳离子交换固相萃取柱，控制流速不高于2毫升/分钟，待所述滤液全部通过后，依次用3毫升体积分数为2%的甲酸水溶液和3毫升甲醇洗涤所述混合型阳离子交换固相萃取柱，弃去全部流出液，最后用3毫升体积分数为5%的氨化甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，得到所述净化液。

6.如权利要求5所述的检测牛奶中卡那霉素的样本前处理方法，其中，所述混合型阳离子交换固相萃取柱活化的方法为：先用3至5毫升甲醇过柱，再用3至5毫升水过柱。

7.一种检测牛奶中卡那霉素的方法，其特征在于，包括：

用权利要求1所述的检测牛奶中卡那霉素的样本前处理方法对待测牛奶样品进行前处理，得到待测液；以及

用液相色谱-串联质谱法对待测液中卡那霉素的含量进行检测。

8.如权利要求7所述的检测牛奶中卡那霉素的方法，其中，所述液相色谱-串联质谱法的色谱条件为：

色谱柱：ACQUITY UPLC HSS T3柱；

柱温：40℃；

进样体积：10微升；

洗脱液体：流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.1%的甲酸水溶液；

梯度洗脱：

　　0 分钟，10%所述流动相A，其余部分为所述流动相B；

　　0至1.5 分钟，10%至25%所述流动相A，其余部分为所述流动相B；

　　1.5至2.5 分钟，25%至100%所述流动相A，其余部分为所述流动相B；

　　2.5至3.0 分钟，100%所述流动相A，其余部分为所述流动相B；

　　3.0至3.5 分钟，100%至10%所述流动相A，其余部分为所述流动相B；

　　3.5至4.5 分钟，10%所述流动相A，其余部分为所述流动相B；和

流速：0.3毫升/分钟。

9.如权利要求7所述的检测牛奶中卡那霉素的方法，其中，所述液相色谱-串联质谱法的质谱条件为：

离子化模式：电喷雾正离子模式；

质谱扫描方式：多反应监测；

电离电压：3.00 千伏；

离子源温度：120℃；

去溶剂气温度：400℃；

去溶剂气：氮气；流量：600升/小时；和

碰撞气：高纯Ar；流量：50升/小时。

10.如权利要求9所述的检测牛奶中卡那霉素的方法，其中，所述液相色谱-串联质谱法的质谱参数为：

保留时间：2.52分钟；

驻留时间：0.05秒；

锥孔电压：40V；

母离子质荷比：485.1；

第一碰撞能量：25eV；

第一子离子质荷比：162.6；

第二碰撞能量：15eV；

第二子离子质荷比：323.8。