[发明专利]用于降低酒中高级醇含量的苹果酶及其制剂和制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种苹果酶及其在降低酒中高级醇含量方面的应用，属于生物制品领域。

背景技术

饮酒是导致人体出现部分疾病的主要原因之一，近年来人们对酒精饮料中乙醇及高级醇危害性的重视程度逐渐加深。由于大多数人缺乏乙醇转化酶，饮酒过度导致的摄入过量乙醇可导致酒精中毒，严重危害人体健康。同时，对于酒类自身而言，过高浓度的高级醇会导致不良风味，当含量超过100mg/L时会使酒的口味和受欢迎程度明显变差；此外过高的高级醇摄入量会对人体产生毒性，其中毒和麻醉作用是乙醇的十几倍，可损害神经系统，使人头痛。因此选择能够合理控制酒精饮品中醇类含量的方法已是迫在眉睫。

目前研究多从优良菌株的选育、酿酒原料的择优以及发酵工艺的改良三方面对酒中醇类物质的生成进行调控，以达到改善酒体品质的目的，但优选酿酒菌株的方法存在一定的缺陷：耗时过长或技术手段复杂。而单纯改变酿酒原料对降低酒类中的高级醇含量效果并不明显，目前尚没有出现通过改变酿酒原料普遍降低酒类中各种高级醇的方法；更改发酵过程的各种理化参数虽然有助于控制高级醇的生成，微调酒类风味，但在发酵过程中降低高级醇会同时降低与高级醇有关的酯类物质含量，弱化了酒的风味。

同时，上述的三种思路均只能在酿酒开始时应用，对于已有的酒类成品中已经生成的高级醇，不能通过改变工艺条件消除或者还原，因此需要采用其他措施进行酒类风味改善和优化。针对这些问题，目前多采用物理化学方法对酒进行改性处理，如高压脉冲电场可以促进酒中高级醇的氧化，使其转化为醛或酸；大孔吸附树脂吸附和纳米膜过滤可分别去除酒中62.39％和44.2％的高级醇，但其特异性较差。

此外，市售的解酒药可以在体内环境下降低对乙醇、高级醇等物质的吸收，或是通过加快人体对摄入的醇类物质的分解代谢，降低血液中醇类浓度，但其长期服用会有一定副作用，影响肝脏、肾脏代谢从而产生不同程度的伤害；或受成本限制，价格较高、不易推广。

发明内容

针对现有技术的缺陷，本申请发明人在多年的研究中，尝试通过生物酶技术来降解酒类中的多种醇类物质，在经过大量艰苦的研究工作和对各种酶的筛选后，发明人欣喜的发现从苹果皮中提取的苹果酶对醇类物质的降解具有显著效果，在此发现的基础上申请人完成了本发明。

为实现发明目的，本发明是通过下述技术方案实现的：

一种用于降低酒中高级醇含量的苹果酶，采用下述方法制成：取苹果的果皮部分，在果皮中加入冷冻有机溶剂在高速组织匀浆机中打浆，将果浆转入烧杯中后继续加入冷冻有机溶剂，用玻璃棒缓慢搅拌后用真空泵抽滤，滤渣再用冷冻的有机溶剂溶解，经玻璃棒搅拌均匀后，再次抽滤；重复上述操作直至滤渣为无色为止，滤渣转入真空干燥器至干，即得苹果酶粗酶粉。

上述所述的苹果，包括目前已有的各种苹果品种，包括但不限于成熟的红富士、嘎啦、红星、黄元帅、乔纳金等，申请人对不同苹果品种中提取的苹果酶的降解性能进行了检测，发现从富士苹果中提取的苹果酶具有最为理想的活性，因此优选苹果的品种为富士。

相应的，本发明公开了苹果酶的制备方法，即取苹果的果皮部分，在果皮中加入冷冻有机溶剂在高速组织匀浆机中打浆，将果浆转入烧杯中后继续加入冷冻有机溶剂，用玻璃棒缓慢搅拌后用真空泵抽滤，滤渣再用冷冻的有机溶剂溶解，经玻璃棒搅拌均匀后，再次抽滤；重复上述操作直至滤渣为无色为止，滤渣转入真空干燥器至干，即得苹果酶粗酶粉。

与上述类似，优选的苹果品种为富士。

在上述方法中，所用的有机溶剂为常见的不被本发明苹果酶降解的有机溶剂，如芳香烃类、醚类和酮类有机溶剂，优选的，考虑到成本和有机毒性的综合需要，所述有机溶剂为丙酮，冷冻温度为-30℃。

本发明的制备方法，进一步的还包括将苹果酶粗酶粉制成苹果酶酶液，具体包括：将苹果酶粗酶粉1溶解于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中，缓慢搅拌然后过滤，取滤液离心，离心所得上清液中加入(NH₄)₂SO₄提高其饱和度，然后静置、高速离心，将所得沉淀溶于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中，所得即为苹果酶酶液。

通过上述方式，能够将苹果酶成分进行富集。

其中，上述所用的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液浓度优选为为0.1M，pH4.6。

进一步的，本发明还公开了一种用于降低酒中高级醇含量的苹果酶制剂，是将苹果酶粗酶粉或权利要求4的苹果酶酶液固定在载体上，所述载体为海藻酸钠或壳聚糖。