[发明专利]多肽及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药与生物检测技术领域，具体而言涉及多肽及其用途，更具体地，本发明涉及分离的多肽及其在制备AQP4多克隆抗体中的用途，制备AQP4多克隆抗体的方法，AQP4多克隆抗体，用于检测AQP4的试剂盒和用于治疗AQP4相关疾病的药物。

背景技术

AQP(aquaporins)家族是近几年来逐渐被发现并认识的一类与水通透有关的膜转运蛋白，广泛分布于机体多处涉及水分子快速跨膜转运的部位，在维持体内水、电解质运输平衡中发挥着重要作用。在哺乳动物组织中已发现13种水通道蛋白(AQP0-AQPl2)。

AQP4是1994年被克隆确认的水通道蛋白家族中的一员，它广泛存在于哺乳动物体内，主要分布于肺、脑、眼等组织内，是脑和眼内分布最多、最广泛的水通道蛋白之一，兼有水运输平衡及渗透压感受器的双重功能，在脑和视网膜内水、电解质运输平衡以及眼内压恒定的调节等方面发挥着重要作用。

AQP4由4个独立的具有活性的亚基单位组成的四异聚体结构，每个亚基的分子量约30kd。AQP4分子的氨基端和羧基端均位于胞内，整个分子前后两部分在序列上相似，呈180度定位的正面对称结构。每个亚单位含有6条疏水性的跨膜α右手螺旋结构，每个亚基单位都有独立的转运水的孔道。各亚单位间有5个不同长度的连接环(A、B、C、D和E环)，A、C、E环为胞外环，B、D环为胞内环。A、C、D环为3个不同长度的连接环；B、E环为2个功能性的长环，分别含3个主要为天冬-脯-丙氨酸(NPA)的氨基酸，这2个NPA环从双分子层相对的面折叠入膜中，在双分子层中线处交叉重叠就形成了狭窄的开放水孔道，且周围被6条跨膜的螺旋所包绕，分子重组体的研究已经预测其每个单位的孔道呈“沙漏”模型。研究证实，大多数AQP膜上存在一种对汞制剂敏感的水通道蛋白，即在第189位氨基酸残基是半胱氨酸，可与汞结合从而堵塞水通道，AQP4在该位置无半胱氨酸，故对汞制剂不敏感，因此AQP4又称为汞不敏感性水通道蛋白。

由于AQP4与青光眼的发病机制有密切关系，此外，它还与一些神经疾病相关，因此，AQP4在某些疾病中的检测有重要意义。由于抗体对于蛋白质的基础研究及其检测方法都是必须的，因此开发AQP4的抗体意义重大。目前，单克隆抗体的亲和力较差且得到一个亲和力较高的单克隆抗体（亲和力常数大于10⁸）比较难，而制备多抗比较容易，且多抗亲合力较高，但是现有的AQP4多克隆抗体特异性较差且假阳率高。

因而，目前选取合适的AQP4蛋白的肽段并制备特异性好、亲合力高的AQP4多克隆抗体，意义重大。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种能够有效用于制备AQP4多克隆抗体的多肽，另一个目的在于提出一种特异性好、亲合力高的AQP4多克隆抗体。

首先，需要说明的是，本发明是基于发明人的下列发现而完成的：