[发明专利]一种喹诺酮类药物快速化学发光检测试剂盒及其测试方法

权利要求书

1.一种喹诺酮类药物快速化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒内设有发光板、经过化学底物处理的喹诺酮类多克隆抗体、经过辣根过氧化酶标记的羊抗兔抗体、喹诺酮类系列标准溶液、浓缩磷酸盐缓冲液、浓缩洗涤液和发光液，所述发光板上有包被抗原，该包被抗原由喹诺酮类药物半抗原与OVA采用混合酸酐法进行偶联得到，所述经过化学底物处理的喹诺酮类多克隆抗体是以诺氟沙星、氧氟沙星衍生物与OVA偶联后制成的偶联物作为免疫原免疫新西兰大白兔所得。

2.如权利要求1所述的喹诺酮类药物快速化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述发光板为乳白色不透明的96孔聚苯乙烯化学发光板。

3.如权利要求1所述的喹诺酮类药物快速化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述喹诺酮类系列标准溶液包括浓度分别为0.lng/mL、0.5ng/mL、0.8ng/mL、1ng/mL、5ng/mL和10ng/mL的喹诺酮类校准液。

4.如权利要求1所述的喹诺酮类药物快速化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述喹诺酮类多克隆抗体在使用时按照1:10000的比例稀释。

5.如权利要求1所述的喹诺酮类药物快速化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述经过辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体在使用时按照1:5000的比例稀释。

6.如权利要求1所述的喹诺酮类药物快速化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述浓缩磷酸盐缓冲液由80g NaCl、2.0g  KH₂P0₄、229.0g  Na₂HP0₄·12H₂0和2.0g  KCl溶于1000mL蒸馏水中制得。

7.如权利要求1所述的喹诺酮类药物快速化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述浓缩洗涤液由浓縮磷酸盐缓冲液与吐温-20混合配制而成，其中吐温-20的浓度为0.05mol/L。

8.如权利要求1所述的喹诺酮类药物快速化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述发光液由底物A和底物B两部分组成，底物A 为0.01M鲁米诺溶解到0.01M pH为8.8的Tris缓冲液中得到的混合物，底物B 为0.001M对碘苯酚溶解到0.01M pH为8.8的Tris缓冲液后再加入其体积3/10000的过氧化氢得到的混合物，所述鲁米诺作为发光物，对碘苯酚为发光增强剂，使用时将底物A和底物B按照1：1的比例混合。

9.利用权利要求1所述的喹诺酮类药物快速化学发光检测试剂盒测试喹诺酮类药物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）加样：按照50μL/孔的加入量向发光板的孔中分别加入喹诺酮类系列标准浓度溶液和样品溶液，然后按照50μL/孔的加入量向孔中加入喹诺酮类多克隆抗体工作液，25℃条件下恒温孵育2.5h；

2）洗涤：倾出孔中液体，按照280μL/孔的加入量向发光板的孔中加入洗涤液，静置5min后倾出洗涤液、拍干，重复三次；

3）加辣根过氧化酶标记的羊抗兔抗体：在发光板的每个孔中加入辣根过氧化酶标记的羊抗兔抗体工作液100μL，25℃条件下恒温孵育1.5h；

4）洗涤：倾出孔中液体，按照280μL/孔的加入量向发光板的孔中加入洗涤液，静置5min后倾出洗涤液、拍干，重复三次；

5）加发光液：在发光板的每个孔中加入发光液100μL；

6）检测：用化学发光免疫分析仪测定发光板每个孔的发光强度；

7）结果判断：取标准品浓度对数做横坐标，标准品检测发光值对数做纵坐标，做标准曲线，根据每一个样品的发光强度，由标准曲线得出每一个样品的浓度。