[发明专利]检测人类艾滋病病毒抗体的免疫层析试纸及其制备方法

权利要求书

1.检测人类艾滋病病毒抗体的免疫层析试纸，其特征在于：包括依次连接的样品垫（1）、硝酸纤维膜（2）和吸水垫（3），所述样品垫（1）含有超顺磁性复合粒子标记重组蛋白A；所述硝酸纤维膜（2）包被有相互分离的检测线（4）和质控线（5），所述检测线（4）含有人类艾滋病病毒重组抗原，所述质控线（5）含有能与所述重组蛋白A特异结合的抗重组蛋白A抗体；所述人类艾滋病病毒为人类艾滋病病毒1+2型。

2.根据权利要求1所述的检测人类艾滋病病毒抗体的免疫层析试纸，其特征在于：所述超顺磁性复合粒子标记重组蛋白A是将重组蛋白A和超顺磁性复合粒子以肽键共价结合形成聚合体。

3.根据权利要求2所述的检测人类艾滋病病毒抗体的免疫层析试纸，其特征在于：所述超顺磁性复合粒子标记重组蛋白A的制备方法包括以下步骤：

a、活化磁性粒子的制备：按重量份数比，称取超顺磁性复合粒子2～3份、EDC0.5～1.5份和NHS1～3份，混匀，在35℃～40℃下反应20～40分钟，随后用缓冲液洗涤，得活化磁性粒子；

b、含有偶联后磁性粒子的反应液制备：按重量份数比，称取所述活化磁性粒子2～3份、重组蛋白A0.1～0.2份和硼砂缓冲液0.5～1份，混匀，在35℃～40℃下反应3～4小时，得含有偶联后磁性粒子的反应液；

c、取所述含有偶联后磁性粒子的反应液，加入占整个所述反应液体积0.5%～1.5%的BSA溶液，混匀，在35℃～40℃下反应20～40分钟，随后将反应得到的封闭后磁性粒子进行洗涤、悬浮，得到超顺磁性复合粒子标记重组蛋白A成品。

4.根据权利要求3所述的检测人类艾滋病病毒抗体的免疫层析试纸，其特征在于：所述超顺磁性复合粒子为超顺磁性Fe₃O₄纳米粒子；所述超顺磁性复合粒子的粒径为60nm～300nm，该粒径的偏差在10%～30%之间；所述超顺磁性复合粒子的磁饱和强度为30emu/g～80emu/g，对应的外磁场响应速度为20秒～100秒。

5.根据权利要求2所述的检测人类艾滋病病毒抗体的免疫层析试纸，其特征在于：在将所述重组蛋白A和超顺磁性复合粒子以肽键共价结合形成聚合体前，还包括将该超顺磁性复合粒子进行活化，使超顺磁性复合粒子表面带有官能团。

6.根据权利要求5所述的检测人类艾滋病病毒抗体的免疫层析试纸，其特征在于：所述官能团为羧基或氨基中的一种；所述官能团的含量为50～500μmol/g。

7.根据权利要求1所述的检测人类艾滋病病毒抗体的免疫层析试纸，其特征在于：在所述检测线（4）中含有人类艾滋病病毒重组抗原的浓度为0.5～2mg/ml；在所述质控线（5）中含有抗重组蛋白A抗体的浓度为0.5～2mg/ml。

8.根据权利要求1所述的检测人类艾滋病病毒抗体的免疫层析试纸，其特征在于：所述人类艾滋病病毒重组抗原为人类艾滋病病毒1+2型基因工程重组抗原；所述人类艾滋病病毒1+2型基因工程重组抗原为gp36、gp41或gp120中的一种。

9.一种基于权利要求1-8中任一项所述的检测人类艾滋病病毒抗体的免疫层析试纸的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：将样品垫（1）、硝酸纤维膜（2）和吸水垫（3）依次连接，将含有人类艾滋病病毒重组抗原和含有能与所述重组蛋白A特异结合的抗重组蛋白A抗体分别喷涂于硝酸纤维膜（2）两端的不同区域，对应形成检测线（4）和质控线（5），得成品。

10.根据权利要求1所述免疫层析试纸在制备人类艾滋病病毒1+2型抗体检测试纸中的应用。