[发明专利]一种罗非鱼亲子鉴定的方法有效
| 申请号： | 201310549480.2 | 申请日： | 2013-11-07 |
| 公开（公告）号： | CN103555847A | 公开（公告）日： | 2014-02-05 |
| 发明（设计）人： | 李建林;俞菊华;唐永凯;李红霞;徐跑 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 李纪昌 |
| 地址： | 214081*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 罗非鱼 亲子鉴定 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种罗非鱼亲子鉴定的方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）采集待鉴别的罗非鱼样品的血样或鳍条，提取基因组DNA；
（2）用步骤（1）获得的基因组DNA为模板，选用9个微卫星引物进行PCR扩增，这9对特异微卫星引物名称和序列列表如下:
（3）将步骤（2）获得的PCR扩增产物用8.0％的非变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳检测、银染法染色后，拍照；
（4）将步骤（3）的电泳检测结果，进行数字化处理，用遗传分析软件进行分析，获得每个个体之间的遗传距离，进行聚类分析，根据个体间的遗传距离聚类结果，进行亲子鉴定。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（2）中，在进行PCR扩增时，PCR反应总体积为10μL，其中含10×反应缓冲液1.0μL，Mg2+2mmol/L，dNTP200μmol/L,上下游引物各0.2μmol/L，Taq酶0.3U，DNA50ng～80ng，用灭菌双蒸馏水补足体积。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中，PCR反应条件为：94℃3min；94℃20s，退火20s，72℃20s，25～30个循环；72℃延伸5min。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（4）中，使用的遗传分析软件为populations软件和MEGA3.1软件。
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