[发明专利]一种罗非鱼亲子鉴定的方法有效

专利信息
申请号: 201310549480.2 申请日: 2013-11-07
公开(公告)号: CN103555847A 公开(公告)日: 2014-02-05
发明(设计)人: 李建林;俞菊华;唐永凯;李红霞;徐跑 申请(专利权)人: 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 李纪昌
地址: 214081*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 罗非鱼 亲子鉴定 方法
【说明书】:

技术领域

发明属于鱼类分子标记技术领域,涉及一种罗非鱼亲子鉴定的方法。

背景技术

罗非鱼(Tilapia)原产于非洲,该鱼上世纪50年代引入我国,得到了较快发展,现在我国已是世界上最大的罗非鱼生产国和出口国。目前,家系选育是广泛应用于水产育种中的一个方法。选一对亲本配组繁殖,得到的后代就是一个家系,用这种方法构建多个家系,再通过养殖对比试验,分析各家系的生长、性别比例、抗逆等性状。由于罗非鱼性腺发育不同步,一对一配组繁殖获得家系成功率较低,因此常用多尾亲本如1雄多雌或多雄1雌的方法来提高构建家系的成功率,这就需要对后代进行亲子鉴定来确定它们的父本和母本。另外,在养殖对比试验中,为减少环境的影响,常常将不同家系的鱼放在同一池塘中养殖,这样也需要进行亲子鉴定来区别不同的家系。

发明内容

本发明的目的是提供一种罗非鱼亲子鉴定的方法,有助于快速、准确对罗非鱼进行亲子鉴定和家系区分。

为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:

一种罗非鱼亲子鉴定的方法,包括以下步骤:

(1)采集待鉴别的罗非鱼的血液、鳍条或其他组织样品,采用DNA提取法提取基因组DNA;

(2)用步骤(1)获得的基因组DNA为模板,选用9个微卫星引物进行PCR

扩增,这9对特异微卫星引物名称和序列列表如下;

正向引物DNA序列(5'-3')反向引物DNA序列(5'-3')退火温度GTTTTGCAGCACATCACCTGGCCACAGTGACTTGACCACA59℃AGCTGCTGGGTGCTCTGACTGCAACCTGCAGAGGAAAC59℃TGCTGGTTAAAAGAAAGAATGTTATGGGTGTTTAGTCTGGAA55℃TATAGAGGGGTGAGGGGAGATAGAATACAAGCGCCACACAT55℃TCGTGCAGCCAAACTTTCATCCGACGCAGCCGAGCAG55℃AAAGGCTGGCACTGGACTAAACTCGCCTATGATGGAA55℃CAGCTCGATAAAGGGAGACGGCTGCATTAGCATCGTGTGT55℃

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