[发明专利]一种鲤春病毒标准样品及其制备方法

权利要求书

1.一种鲤春病毒标准样品的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤：

a.病毒的增殖

选长满单层的EPC细胞，倒掉培养液，接种鲤春病毒的病毒液；于15℃吸附2小时；补加M199维持液，继续培养至细胞病变达到80%以上，收获病毒培养物，于-20℃保存备用；

b.冻干工艺

冻干保护剂由以下组分按重量体积比配制而成，海藻糖：去离子水为5%，脯氨酸：去离子水为5%，脱脂奶粉：去离子水为10%；

冻干工艺为：取步骤a中病毒培养物与步骤b中的冻干保护剂按等体积比均匀混合，于-30℃中预冻24h后，移至冻干机中，保持真空度在30～40mtorr间，真空干燥24h，即为鲤春病毒标准样品。

2.根据权利要求1所述的鲤春病毒标准样品的制备方法，其特征在于步骤a所述收获病毒培养物为：待EPC细胞感染SVC病毒后脱落，出现细胞病变后反复冻融细胞培养物三次，于4℃，10000r/min离心10min制备获得。

3.根据权利要求1所述的鲤春病毒标准样品的制备方法，其特征在于步骤b所述冻干保护剂经过108℃,15min灭菌。

4.根据权利要求1所述的鲤春病毒标准样品的制备方法，其特征在于步骤a收获病毒培养物的TCID₅₀值为10^-6.7525/0.1ml。

5.一种利用权利要求1所述方法制备的鲤春病毒标准样品。