[发明专利]一种新型内酰胺类抗生素合成酶及其编码基因和应用有效
| 申请号： | 201310557812.1 | 申请日： | 2013-11-11 |
| 公开（公告）号： | CN103695447A | 公开（公告）日： | 2014-04-02 |
| 发明（设计）人： | 刘力强;牛昆;吕娜;贾娟娟;范俊辉;石晨光;王召业;武芳;王欢;杨丽萍;邸胜苗;刘东 | 申请（专利权）人： | 华北制药河北华民药业有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N15/55 | 分类号： | C12N15/55;C12N9/84;C12N15/70;C12N1/21;C12P37/04;C12P35/04 |
| 代理公司： | 石家庄国域专利商标事务所有限公司 13112 | 代理人： | 白海静 |
| 地址： | 052165 河北省石*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 新型 内酰胺 抗生素 合成 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种新型内酰胺类抗生素合成酶的编码基因，其特征是，其为下述核苷酸序列之一：
（a）具有SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列；
（b）与SEQ ID NO:3所示核苷酸序列具有80％以上同源性的核苷酸序列，且编码具有内酰胺抗生素合成酶活性的蛋白质；
（c）在高严谨条件下可以与SEQ ID NO:3所限定的核苷酸序列杂交，且编码具有内酰胺抗生素合成酶活性的蛋白质的核苷酸序列。
2.权利要求1所述的新型内酰胺类抗生素合成酶，其特征是，其是在如SEQ ID NO:1所示青霉素酰化酶的氨基酸序列基础上，有如下至少一个位点的突变：第184位天冬酰酸替换为酪氨酸、第330位苯丙氨酸替换为丙氨酸、第415位赖氨酸替换为精氨酸、第454位亮氨酸替换为丙氨酸、第623位天冬氨酸替换为天冬酰胺、第770位亮氨酸替换为苯丙氨酸、第790位甘氨酸替换为丙氨酸。
3.根据权利要求2所述的新型内酰胺类抗生素合成酶，其特征是，其是由SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成。
4.根据权利要求3所述的新型内酰胺类抗生素合成酶，其特征是在所述SEQ ID NO:2所示青霉素酰化酶的氨基酸序列基础上，有如下至少一个位点的突变：第184位天冬酰酸替换为酪氨酸、第454位亮氨酸替换为丙氨酸、第623位天冬氨酸替换为天冬酰胺、第790位甘氨酸替换为丙氨酸。
5.含有权利要求1所述编码基因的重组载体。
6.含有权利要求1所述编码基因的重组菌株。
7.根据权利要求6所述的重组菌株，其特征是，构建所述重组菌株所用到的宿主菌为E.coliBL21(DE3)或E.coliJM109(DE3)。
8.权利要求2~4所述新型内酰胺类抗生素合成酶在内酰胺类抗生素合成中的应用。
9.权利要求2~4所述新型内酰胺类抗生素合成酶在阿莫西林、头孢菌素和头孢克洛合成中的应用。
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