[发明专利]转基因水稻品系223F-S21的外源插入片段旁侧序列及其应用有效
申请号: | 201310557887.X | 申请日: | 2013-11-11 |
公开(公告)号: | CN103773759A | 公开(公告)日: | 2014-05-07 |
发明(设计)人: | 杨永义;沈志成 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转基因 水稻 品系 223 s21 插入 片段 旁侧 序列 及其 应用 | ||
1.转基因水稻品系223F-S21的外源插入片段的旁侧序列,所述旁侧序列为3’端旁侧序列,其特征在于:3’端旁侧序列如SEQ ID NO.1所示。
2.转基因水稻品系223F-S21的外源插入片段的旁侧序列,所述旁侧序列为5’端旁侧序列,其特征在于:5’端旁侧序列如SEQ ID NO.2所示。
3.如权利要求1所述的旁侧序列的制备方法,其特征在于:提取转基因水稻品系223F-S21的基因组DNA,通过TAIL-PCR扩增得到。
4.如权利要求2所述的旁侧序列的制备方法,其特征在于:提取转基因水稻品系223F-S21的基因组DNA,通过PCR扩增得到。
5.转基因水稻品系223F-S21的外源插入片段的旁侧序列的定性PCR检测方法,其特征在于:一条引物为依据SEQ ID NO.1中1-1155位序列设计的正向引物,另一条引物为依据SEQ ID NO.1的1156-1792位序列设计的反向引物;即,所述PCR反应中的两条引物组合为权利要求1所述旁侧序列的特异性引物。
6.根据权利要求5所述的定性PCR检测方法,其特征在于:
所述正向引物Rice-L序列为:
5’-ACACAAGAAATAGAGGAAGCAGAGGAAT-3’
所述反向引物LB-R序列为:
5’-GCAAGGAACAGTGAATTGGAGTTCGTC-3’。
7.转基因水稻品系223F-S21的外源插入片段的旁侧序列的定性PCR检测方法,其特征在于:一条引物为依据SEQ ID NO.2中1-516位序列设计的正向引物,另一条引物为依据SEQ ID NO.2的517-1276位序列设计的反向引物;即,所述PCR反应中的两条引物组合为权利要求2所述旁侧序列的特异性引物。
8.根据权利要求7所述的定性PCR检测方法,其特征在于:
所述正向引物RB-F序列为:5’-GTCGCTGGTAGATGGTTGGCTGCAGGTCGT-3’
所述反向引物Rice-R序列为:5’-TATCATATCACTCGTAGATCCCTTCTGCCT-3’。
9.转基因水稻品系223F-S21的外源插入片段的旁侧序列的定性PCR检测方法,其特
征在于:所述PCR反应中同时含有下列引物:
正向引物Rice-L:5’-ACACAAGAAATAGAGGAAGCAGAGGAAT-3’
反向引物LB-R:5’-GCAAGGAACAGTGAATTGGAGTTCGTC-3’
正向引物RB-F:5’-GTCGCTGGTAGATGGTTGGCTGCAGGTCGT-3’
反向引物Rice-R:5’-TATCATATCACTCGTAGATCCCTTCTGCCT-3’。
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