[发明专利]转基因水稻品系223F-S21的外源插入片段旁侧序列及其应用有效
申请号: | 201310557887.X | 申请日: | 2013-11-11 |
公开(公告)号: | CN103773759A | 公开(公告)日: | 2014-05-07 |
发明(设计)人: | 杨永义;沈志成 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转基因 水稻 品系 223 s21 插入 片段 旁侧 序列 及其 应用 | ||
技术领域
本发明涉及生物技术领域的基因序列,具体的说,涉及一种转基因水稻品系223F-S21的外源插入片段的旁侧序列。
背景技术
随着基因工程技术的不断发展,转基因作物玉米、大豆、油菜、棉花、番茄等新品种不断涌现,许多国家已经允许转基因作物的种植和生产。水稻是我国最重要的粮食作物之一,转基因技术在水稻中的深入研究和广泛应用,目前已经有多个转基因水稻品系进行了环境释放,申请商业化种植。由于转基因产品存在生态风险和食品安全等一系列问题,因此,世界各国制定了相应的安全管理法律法规。对转基因植物进行品系特异性的检测是对转基因植物进行监督管理,保障其健康发展的重要技术基础。而转基因植物的外源插入片段的旁侧序列是转基因植物品系最重要的分子特征之一,因此,外源插入片段的旁侧序列是建立转基因植物品系特异性检测方法的重要技术资料。
目前已经有相关专利和文献报道了转基因植物外源插入旁侧序列,例如:张大兵等人于2006年利用TAIL-PCR方法分析了玉米品系MON863的外源插入片段的旁侧序列,建立了转基因MON863玉米的品系特异性检测方法。谢家建等人于2007年利用TAIL-PCR、genome walking和LD-PCR等方法获得了转基因水稻克螟稻、Bt汕优863和科丰6号的外源插入片段的旁侧序列,杨正友等人于2012年利用TAIL-PCR方法建立了转基因水稻品系SK-2的外源插入片段的旁侧序列,并建立了品系特异性的检测方法。然而,对现有的专利和文献的分析发现,还没有任何关于转基因水稻品系223F-S21的外源插入片段的旁侧序列的文章和专利报道。
所涉及的参考文献具体如下:
1、Liu Y-G,Mitsukawa N,Oosumi T,Whittier RF.1995.Efficient isolation and mapping of Arabidopsis thaliana T-DNA insert junctions by thermal asymmetric interlaced PCR(使用热不对称交错PCR法对拟南芥T-DNA插入结点的有效分离和作图);
2、The Plant Journal8:457-463.Sambrook,Joseph,Russell and W.David.2001.Molecular Cloning:a laboratory manual(分子克隆:一部实验手册).Volum 1-3.Cold Spring Harbor Laboratory Press;
3、沈志成,林朝阳,徐晓丽,李新兰的高抗草甘膦特变基因及其改良方法和应用,CN201110009329[P].2011-08-10;
4、谢家建,王锡锋,彭于发的转基因水稻品系克螟稻1的外源插入片段的旁侧序列;中国,200710063778.7[P].2008-08-13;
5、谢家建,王锡锋,彭于发.转基因水稻品系Bt汕优63的外源插入片段的旁侧序列:中国,200710063777.2[P].2008-08-13;
6、谢家建,王锡锋,彭于发.转基因水稻品系科丰6号的外源插入片段的旁侧序列:中国,200710063780.4[P].2008-08-13;
7、杨正友,李文华,赵凤春,田园.一种转基因水稻外源插入载体旁侧序列及其应用:201210084127.7[P].2012-08-08;
8、张大兵,杨立桃,潘爱虎,梁婉琪,尹长松,许诵辞,章可为,武爱波.玉米品系MON863的外源插入载体的旁邻基因序列:中国,200510027952.3[P].2006-03-01。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种转基因水稻品系223F-S21的外源插入片段的旁侧序列及其用途。
为了解决上述技术问题,本发明提供一种转基因水稻品系223F-S21的外源插入片段的旁侧序列,所述旁侧序列为3’端旁侧序列,3’端旁侧序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还同时提供了另一种转基因水稻品系223F-S21的外源插入片段的旁侧序列,所述旁侧序列为5’端旁侧序列,5’端旁侧序列如SEQ ID NO.2所示。
本发明还同时提供了上述旁侧序列的制备方法:提取转基因水稻品系223F-S21的基因组DNA,通过TAIL-PCR扩增得到。
本发明还同时提供了上述旁侧序列的制备方法:提取转基因水稻品系223F-S21的基因组DNA,通过PCR扩增得到。
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