[发明专利]高表达gga-miR-9*的鸡胚成纤维传代细胞株有效
申请号: | 201310565243.5 | 申请日: | 2013-11-13 |
公开(公告)号: | CN103773735A | 公开(公告)日: | 2014-05-07 |
发明(设计)人: | 欧阳伟;王永山;潘群兴;王晓丽;夏兴霞;刘华洁;张海彬 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/867;C12N7/00;C12R1/93 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 张素卿 |
地址: | 210014 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 表达 gga mir 鸡胚成 纤维 传代 细胞株 | ||
1.一种能高表达gga-miR-9*的鸡胚成纤维传代细胞株,该细胞株DF-miR-9*保藏号为C2013177。
2. 根据权利要求1所述的细胞株,其制备方法为:
用PCR方法从鸡的肝细胞基因组中扩增pri-gga-miR-9*,克隆于慢病毒表达质粒pLenti中构建重组质粒pL-miR-9*,将pL-miR-9*和3个包装质粒pLP1、pLP2和pLP/VSVG共转染293FT细胞,制备含gga-miR-9*基因的重组慢病毒VL+miR-9*;用VL+miR-9*感染鸡胚成纤维传代细胞DF-1,经杀稻瘟菌素筛选获得高表达gga-miR-9*的鸡胚成纤维传代细胞株DF-miR-9*。
3.权利要求1或2所述的细胞株DF-miR-9*在IBDV抗原制备和疫苗生产中的应用。
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