[发明专利]盐穗木金属硫蛋白基因及其重组蛋白与应用

权利要求书

1.一种盐穗木金属硫蛋白基因，其特征在于，所述的盐穗木金属硫蛋白基因具有如序列表SEQ ID NO.1所示的碱基序列，其编码氨基酸序列如表SEQ IDNO.2所示。

2.一种盐穗木金属硫蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如序列表SEQ I D NO.2所示。

3.一种重组表达载体，其特征在于，包含权利要求1所述的盐穗木金属硫蛋白基因的核苷酸序列。

4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于，该重组表达载体的载体骨架优选pET-32a(+)原核表达载体。

5.一种重组表达转化体，其特征在于，包含权利要求1所述的核苷酸序列或权利要求3～4任一项所述的重组表达载体。

6.根据权利要求5所述的重组表达转化体，其特征在于，其为大肠杆菌E.coliBL21(DE3)。

7.一种重组盐穗木金属硫蛋白的制备方法，培养诱导权利要求5所述的重组表达转化体，获得重组的盐穗木金属硫蛋白，其特征在于，具体通过将提取的质粒pET32a-HcMT5μL转化感受态细胞E.coli BL21，氨苄青霉素筛选获得阳性克隆；将含重组质粒的阳性克隆在37℃培养过夜，再以1％比例接种，37℃培养2～3h，当菌液的吸光度值A₆₀₀达到0.6时，加入IPTG至终浓度0.5M，于37℃诱导6h；取培养液1.5mL，12000rpm离心3min，收集沉淀，沉淀用pH7.4的50μL PBS重悬，然后加入等体积的SDS缓冲液振荡后，置沸水浴中5min，12000rpm离心10min，采用SDS-PAGE电泳检测结果，证实获得纯化的重组盐穗木金属硫蛋白。

8.一种如权利要求1-3任一项所述的重组盐穗木金属硫蛋白在制备重金属螯合解毒剂中的应用。

9.一种如权利要求1-3任一项所述的重组盐穗木金属硫蛋白在制备食品保健营养素中的应用。

10.一种权利要求1-3任一项所述的重组盐穗木金属硫蛋白在制备化妆品添加剂中的应用。