[发明专利]一种枯草芽孢杆菌菌株A33、菌剂及制备方法和应用

权利要求书

1.一种枯草芽孢杆菌菌株A33（Bacillius subtilis A33），保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.7468。

2.一种微生物菌剂，其特征在于，活性成分为权利要求1所述的枯草芽孢杆菌A33菌体、芽孢及其胞外代谢产物。

3.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述的菌剂为液态菌剂。

4.一种权利要求2或3所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：

步骤1、菌种活化：

将低温保藏的A33菌株接种LB固体培养基上，并在28-37℃下培养18～24小时，然后挑取单菌落接种于LB斜面培养基上，并在28～37℃下培养18～24小时，再用无菌水洗涤培养基表面，将洗脱液作为接种液；

步骤2、种子液的制备：

在LB液体培养基中接入步骤1制备的接种液，所用培养基和接种液的体积比为1：0.05%～0.5%，在28～37℃下震荡培养12～18小时，得到种子液；

步骤3、发酵培养：

将步骤2所得种子液接入发酵培养基中，所用发酵培养基发酵培养基和种子液的体积比为1：1%～1：10%，在28～37℃、摇床转速为150～23Orpm的条件下培养32-44小时，得到菌株A33的液体制剂；

步骤4、液体菌剂制备：

将步骤3得到的发酵液与表面活性剂混匀后制成微生物菌剂。

5.根据权利要求4所述的微生物菌剂制备方法，其特征在于，所述的步骤3中发酵培养基的组分为：蔗糖2%～4%，玉米淀粉2%～4%，豆饼粉0.5%～1.5%，NaCl0.3%～0.5%，CaCO₃0.01%～0.03%，MgSO₄·7H₂O0.02～0.04%，余量为水，以上各组分的质量百分比之和为100%，pH7.0-7.5。

6.权利要求2所述的微生物菌剂的使用方法，其特征在于，将微生物菌剂按1:30～1:200的体积比例用水稀释，将稀释后的液体菌剂于植物发病高峰前进行叶面、花蕾和果实表面喷施或全株喷施，或同时喷洒于植物栽培的土壤。

7.权利要求2所述的微生物菌剂在防治设施蔬菜栽培中植物真菌病害的应用。