[发明专利]一种检测环境雌激素的重组酵母及其构建方法和用途无效
| 申请号： | 201310574108.7 | 申请日： | 2013-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN103555601A | 公开（公告）日： | 2014-02-05 |
| 发明（设计）人： | 马广智;陈美玲;武佳韵;凌源智;刘琳;黄儒强;陈世文;吴萍萍;尹艳艳;章凌霄;黄中豪;曾健辉;孔繁茂;朱宝君 | 申请（专利权）人： | 华南师范大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12Q1/37;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 郭炜绵 |
| 地址： | 510631 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 环境 雌激素 重组 酵母 及其 构建 方法 用途 | ||
1.一种检测环境雌激素的重组酵母，其特征在于含有酵母表达质粒和酵母报告质粒；
所述的酵母表达质粒包含序列如SEQ ID No.1所示的唐鱼雌激素受体基因TERα；
所述的酵母报告质粒，其载体是pMP206，载体上连接序列如SEQ ID No.4所示的唐鱼卵黄蛋白原基因启动子2；
所述的酵母是酵母菌株AH109。
2.根据权利要求1所述的检测环境雌激素的重组酵母，其特征在于：所述的酵母表达质粒，其载体为pGADT7。
3.根据权利要求1所述的检测环境雌激素的重组酵母，其特征在于：所述的环境雌激素是雌二醇。
4.根据权利要求1所述的检测环境雌激素的重组酵母，其特征在于：所述的环境雌激素是17-β雌二醇。
5.权利要求1-4任一项所述的检测环境雌激素的重组酵母的构建方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）将唐鱼雌激素受体基因TERα序列连接到载体上，构建表达质粒；
（2）将唐鱼卵黄蛋白原基因启动子2序列连接到载体pMP206上，构建报告质粒pMP206/pr2；
（3）将上述的表达质粒和报告质粒转染酵母细胞，得到检测环境雌激素的重组酵母。
6.权利要求1-4任一项所述的重组酵母在检测环境雌激素中的应用。
7.根据权利要求6所述的重组酵母在检测环境雌激素中的应用，其特征在于包括以下步骤：
将权利要求1-4任一项所述的重组酵母置于添加有CuSO4的液体SD培养基中，加入待测样品，30℃下振荡培养18h，测定β-半乳糖苷酶活性，根据β-半乳糖苷酶活性的变化计算待测样品中雌激素的含量；
所述的液体SD培养基不含亮氨酸和尿嘧啶，其中CuSO4的质量体积浓度是0.1%。
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