[发明专利]磷酸替米考星中残留溶剂的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及制药技术领域，特别是涉及一种磷酸替米考星中残留溶剂的检测方法。

背景技术

替米考星是一种动物专用的新型大环内酯类抗生素，临床主要用于牛、猪、鸡、绵羊、山羊、兔等感染性疾病，特别是用于畜禽呼吸道疾病，并取得显著疗效。该药具有抗菌活性强、药代动力学特征优良、用量少、毒性小等特点。临床应用表明：替米考星是一种安全有效的新型兽药，具有广阔的应用前景。

替米考星具有同泰乐菌素相似的广谱抗菌活性，对革兰氏阳性菌和某些革兰氏阴性菌、霉形体、螺旋体等均有抑制作用，对胸膜肺炎放线杆菌、巴氏杆菌及霉形体具有比泰乐菌素更强的抗菌活性。Inamoto等报道，替米考星(TMS)、金霉素(CTC)、甲砜霉素(TP)和泰乐菌素(TS)对日本1980～1989年间从猪肺炎损害部位分离出的61株多杀性巴氏杆菌和35株胸膜肺炎放线杆菌的抗菌作用，大多数菌株对TMS、CTC、TP敏感。CTC和TP分别在3.13μg/ml和0.78μg/ml时对51株(83.6%)和46株(75.4%)多杀性巴氏杆菌有抑制作用。TS对几乎所有菌株的抗菌活性较低，MIC≥6.25μg/ml。TMS对23株(37.7%)多杀性巴氏杆菌的MIC≥1.56μg/ml，但在3.13μg/ml时，TP和TMS分别能抑制32株(91.4%)和33株(94.3%)放线杆菌，可见作为同一大环内酯类药物，泰乐菌素对两种细菌的抗菌活性均不及替米考星。Salmon SA等用从美国、加拿大分离到的515株致病菌对头孢噻呋、恩诺沙星、红霉素、磺胺二甲嘧啶、壮观霉素、林可霉素、磺胺嘧啶/TMP、氨苄青霉素和替米考星等9种药物的敏感性进行测定。结果发现，抗菌作用最强的是恩诺沙星和头孢噻呋，替米考星对巴氏杆菌和胸膜肺炎放线杆菌活性中等。替米考星对鸡霉形体表现出较强的体外抗菌活性。Jordan等报道了替米考星和泰乐菌素对家禽6株鸡败血霉形体和3株滑液霉形体的体外MIC值。替米考星对6株鸡败血霉形体的MIC值分别为：＜0.0125、0.0025、0.0025，＞12.5、0.004、0.1、0.0125、0.006和0.025μg/ml；而泰乐菌素的MIC值则分别为：＜0.0125、0.02、0.02、3.2、0.016、0.8、0.0125、0.025和0.025μg/ml。Ziv等应用替米考星对从奶牛乳房炎分离的112株金黄色葡萄球菌和其它致病菌进行MIC-90测定。结果替米考星对乳房炎金黄色葡萄球菌和链球菌均很敏感，其中对化脓性链球菌活性最强(MIC-90为0.04μg/ml)。替米考星在小于3.12μg/ml时能抑制90.8%的其它革兰氏阳性乳房炎致病菌。

综上所述，替米考星作为一种较新的大环内酯类抗生素，其较强的抗菌活性和优越的药物动力学特征，使它在畜禽敏感菌引起的肺炎、巴氏杆菌病以及乳房炎等疾病的防治方面发挥着重要作用。因此，建立磷酸替米考星的质量控制体系，保证其产品质量就具有非常实际的意义。

磷酸替米考星的合成过程中，使用过乙酸丁酯及正丁醇，这些溶剂的残留不仅降低产品的质量，同时会对药品的安全性带来影响，但原标准没有对这两项溶剂进行测定，为此我们通过试验采用气相色谱法建立乙酸丁酯、正丁醇的检测方法，并规定合理的限度，以确保磷酸替米考星的安全性。

发明内容

本发明的目的就在于提供一种磷酸替米考星中残留溶剂的检测方法。

本发明采用下述技术方案实现：

一种磷酸替米考星中残留溶剂的检测方法，其特征在于采用气相色谱法，以顶空进样的方式进行检测。

所述气相色谱法检测过程为：

1）对照品溶液的制备：精密称取乙酸丁酯和正丁醇对照品适量，加水制成每1ml分别含乙酸丁酯、正丁醇各50μg的溶液，取10ml置顶空瓶中，加盖密封；

2）供试品溶液的制备：取磷酸替米考星样品0.25g，精密称定，置25ml容量瓶中，加水溶解并稀释到刻度，摇匀，精密量取10ml置顶空瓶中，加盖密封；

3）测定：以顶空进样的方式将上述对照品溶液和供试品溶液注入气相色谱仪中，根据外标法计算残留量，

其中色谱条件为：以聚乙二醇为固定相的Rtx-WAX毛细管柱（柱长30m，内径0.53mm，膜厚1.0μm），柱温为恒温：30～60℃；用氢火焰离子化检测器检测，检测器温度240～260℃；进样口温度200℃；柱流量1.0～2.0ml/min；载气：高纯氮气；