[发明专利]同型半胱氨酸质控品及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域，具体涉及一种同型半胱氨酸质控品，以及该同型半胱氨酸质控品的制备方法。

背景技术

同型半胱氨酸（Hcy）即2-氨酸-4-巯基丁酸，也称高半胱氨酸，是一种含硫氨基酸，参与甲硫氨酸的代谢过程，可被甲基化生成蛋氨酸，或被转硫化作用生成半胱氨酸，是蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的重要中间产物，并可释放到血液中。目前研究认为，Hcy是独立的心脑血管疾病最新监测指标，其水平升高与心、脑血管及周围血管动脉粥样硬化病变有关，并与老年痴呆、肾功能衰竭、流产及糖尿病早亡有关，所以Hcy的体外检测具有重要的临床价值，可用于预测脑血管疾病发生的危险性。

Hcy测定是指测定血清或者血浆中总的同型半胱氨酸（tHcy）的含量。在血清或者血浆中，游离的或者说处于还原态的Hcy含量很低，仅占tHcy总量的2%左右，其他的均为结合的或者处于氧化态的Hcy。其结合方式包括：自身氧化：Hcy-S-S-Hcy（5-10%）；与半胱氨酸（Cys）氧化：Hcy-S-S-Cys（5-10%）；与白蛋白（Alb）中的半胱氨酸结合氧化：Hcy-S-S-Alb(70-90%)。

目前检测血浆中Hcy主要采用酶循环法，该法可以在自动生化分析仪上进行，测定灵敏度高，广泛应用于临床检验。酶循环法测定Hcy中，加入一定浓度的还原剂TCEP将氧化态的Hcy转化为还原态的Hcy，从而保证结果的准确性。

Hcy的测定需要一个准确、稳定的质控品来监控仪器状态及试剂的好坏。由于血清的不易获得性、成分的复杂性、可能带有HIV等病毒，导致无法采用血清作为基质制备Hcy质控品。而市场上常见的Hcy质控品多为水剂，与Hcy在血清中的存在状态有很大的区别，且存在稳定性差的问题：4℃放置1个月即有明显的下降，放置一年值降为原来的一半，给临床检验带来很大的困难。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对以上现有技术的不足，提供一种同型半胱氨酸质控品，该同型半胱氨酸质控品成分稳定，Hcy的存在状态与人血清中同，稳定性好，准确度高、抗干扰能力强，使用安全。

一种同型半胱氨酸质控品，包括高浓度品和低浓度品，所述高浓度品包括以下浓度的各组分：20-200mMpH7.0-7.5的缓冲液、9g/L氯化钠、0.1-10mM金属螯合剂、0.1-5%（g/100mL）防腐剂、0.1-30%（g/100mL）糖类或多元醇、设定浓度的同型半胱氨酸，其中同型半胱氨酸的存在状态及各存在状态的比例为：还原态Hcy1-3%，Hcy-S-S-Hcy5-10%、Hcy-S-S-Cys5-10%、Hcy-S-S-Alb70-90%；所述低浓度品包括以下浓度的各组分：20-200mMpH7.0-7.5的缓冲液、9g/L氯化钠、0.1-10mM金属螯合剂、0.1-5%（g/100mL）防腐剂、0.1-30%（g/100mL）糖类或多元醇、设定浓度的同型半胱氨酸，其中同型半胱氨酸的存在状态及各存在状态的比例为：还原态Hcy1-3%，Hcy-S-S-Hcy5-10%、Hcy-S-S-Cys5-10%、Hcy-S-S-Alb70-90%。

作为优选，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液、乙酸-乙酸钠缓冲液、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液、甘氨酸-盐酸缓冲液或GOOD’s缓冲液中的一种，进一步优选为磷酸盐缓冲液。

作为优选，所述金属螯合剂为EDTA、DTPA、EGTA、NTA中的一种。

作为优选，所述防腐剂为Proclin系列防腐剂、NaN3、G418、叠氮锂中的一种。

作为优选，所述糖类为海藻糖、甘露醇、右旋糖酐、葡聚糖、葡萄糖、乳糖中的一种，进一步优选为海藻糖。

作为优选，所述多元醇为甘油、PEG4000、乙二醇中的一种，进一步优选为甘油。

所述高浓度品和低浓度品中的缓冲液、金属螯合剂、防腐剂、糖类或多元醇的种类相同。

本发明上述同型半胱氨酸质控品的制备方法，具有以下操作步骤：

（1）高值制备：在20-200mMpH7.0-7.5的缓冲液中加入5-10mML-半胱氨酸、30-50g/L重组人白蛋白，混匀使形成反应液，向反应液中加入0.001-0.1g/L同型半胱氨酸，于25℃-37℃下进行氧化反应1-10天，反应结束后18000rpm×30min离心取上清液；