[发明专利]一种拟小叶喇叭藻组织培养的方法有效
申请号: | 201310584061.2 | 申请日: | 2013-11-20 |
公开(公告)号: | CN103718953A | 公开(公告)日: | 2014-04-16 |
发明(设计)人: | 张明 | 申请(专利权)人: | 青岛佰众化工技术有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京一格知识产权代理事务所(普通合伙) 11316 | 代理人: | 滑春生;赵永伟 |
地址: | 266000 山东省青岛市市南*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 小叶 喇叭 组织培养 方法 | ||
1.一种拟小叶喇叭藻组织培养的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)制备外植体:以拟小叶喇叭藻的假根作为外植体,用毛刷将外植体上附着的杂藻等附着物清除干净后,将外植体置于浓度为1~5%的链霉素中浸泡2~4h,然后再将外植体取出,于1%聚维酮碘中消毒1~3min,,再将外植体取出放入浓度为1~3%的次氯酸钠溶液中消毒1~5min,最后用冷却的过滤高压灭菌海水冲洗干净;
(2)接种:无菌操作台中将假根外植体切成长度为0.2-0.5cm的切段,并将切段接种到液体再生诱导培养基中,每个培养皿中接种5个切段;
(3)培养:摇床培养,摇床的速度为80~100r/min,培养条件为光强4000~5000Lx、光照时间12h、温度18~22℃,培养4-6周至再生芽形成。
2.根据权利要求1所述的拟小叶喇叭藻组织培养的方法,其特征在于,所述的链霉素的浓度为2%,浸泡时间为3h。
3.根据权利要求1所述的拟小叶喇叭藻组织培养的方法,其特征在于,所述的聚维酮碘的消毒时间为2min。
4.根据权利要求1所述的拟小叶喇叭藻组织培养的方法,其特征在于,所述的次氯酸钠的浓度为2%,消毒时间为3min。
5.根据权利要求1所述的拟小叶喇叭藻组织培养的方法,其特征在于,所述的拟小叶喇叭藻的再生诱导培养基的配方为:以PES培养基为基本培养基,1L PES培养基中添加NAA 0.5~4mg、KT 0.5~2mg、抗坏血酸5~10mg、蔗糖30g。
6.根据权利要求1或权利要求5所述的拟小叶喇叭藻组织培养的方法,其特征在于,所述的拟小叶喇叭藻的再生诱导培养基的配方为:以PES培养基为基本培养基,1L PES培养基中添加NAA 2mg、KT 1mg、抗坏血酸7mg、蔗糖30g。
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