[发明专利]骨髓细胞培养终止液及应用有效
申请号: | 201310591779.4 | 申请日: | 2013-11-22 |
公开(公告)号: | CN103667458A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 |
发明(设计)人: | 程建兵;夏成青;陈红梅;郭福晓;生帅 | 申请(专利权)人: | 武汉艾迪康医学检验所有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N1/30 |
代理公司: | 杭州裕阳专利事务所(普通合伙) 33221 | 代理人: | 江助菊 |
地址: | 430023 湖北省武汉市江汉*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 骨髓 细胞培养 终止 应用 | ||
1.一种骨髓细胞培养终止液,包括溴化乙锭和秋水仙胺,其中,溴化乙锭浓度为1.5~5.5mg/ml,秋水仙胺浓度为8~15μg/ml。
2.根据权利要求1所述的细胞培养终止液,其特征在于,溴化乙锭浓度为3mg/ml,秋水仙胺浓度为12μg/ml。
3.根据权利要求1所述的细胞培养终止液,其特征在于,溴化乙锭的配制方法如下:
a. 配制储藏液
在100ml蒸馏水中加入0.9g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于室温;
b. 配制工作液
储藏液以1:2(EB:ddH2O)的比例稀释成浓度为3mg/ml的工作液。
4.根据权利要求1所述的细胞培养终止液,其特征在于,秋水仙胺的配制方法如下:
a.配制储藏液
称取12 mg秋水仙胺,加入8.5g/L NaCl溶液100mL,待完全溶解后,经5.516×104Pa(81bf/in2)15min高压蒸汽灭菌后避光保存于4℃冰箱中;
b.配制工作液
取120μg/ml秋水仙胺溶液1mL加入8.5g/L NaCl溶液9mL即为12μg/ml的工作液。
5.权利要求1至4之一所述的骨髓细胞培养终止液在骨髓染色体标本制作中的应用,其特征在于,以培养基用量为5ml计,向培养基中加入50μl的溴化乙锭和25μl的秋水仙胺。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,将溴化乙锭和秋水仙胺加入培养基,摇晃均匀后37℃,5.0%CO2培养箱孵育1小时。
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