[发明专利]水稻种子耐盐萌发主效QTL位点qGR2的分子标记及其应用

权利要求书

1.水稻种子耐盐萌发主效QTL位点qGR2的分子标记，其特征在于所述的分子标记选自RM13441、P8、RM13443中的任意一种；所述的分子标记RM13441上游引物为RM13441L：SEQ ID NO.1，下游引物为RM13441R：SEQ ID NO.2，扩增产物大小为87bp；所述的分子标记P8上游引物为P8L：SEQ ID NO.3，下游引物为P8R：SEQ ID NO.4，扩增产物大小为252bp；所述的分子标记RM13443上游引物为RM13443L：SEQ ID NO.5，下游引物为RM13443R：SEQ ID NO.6，扩增产物大小为182bp。

2.权利要求1所述的分子标记在水稻种子萌发期耐盐性分子筛选中的应用。

3.权利要求1所述的水稻种子耐盐萌发主效QTL位点qGR2的分子标记引物，其特征在于所述的分子标记RM13441上游引物为RM13441L：SEQ ID NO.1，下游引物为RM13441R：SEQ ID NO.2，扩增产物大小为87bp；所述的分子标记P8上游引物为P8L：SEQ ID NO.3，下游引物为P8R：SEQ ID NO.4，扩增产物大小为252bp；所述的分子标记RM13443上游引物为RM13443L：SEQ ID NO.5，下游引物为RM13443R：SEQ ID NO.6，扩增产物大小为182bp。

4.权利要求3所述的分子标记引物在水稻种子萌发期耐盐性分子筛选中的应用。

5.水稻种子萌发期耐盐性分子筛选方法，其特征在于包含如下步骤：

（1）取水稻叶片，提取基因组DNA。

（2）利用权利要求3所述的分子标记引物对所述的基因组DNA进行PCR扩增，PCR扩增产物在8%非变性聚丙烯酰胺胶上进行电泳检测，如果扩增出对应大小的DNA片段，标志着耐盐基因qGR2增效等位基因的存在。

6.根据权利要求3所述的水稻种子萌发期耐盐性分子筛选方法，其特征在于所述的PCR反应：体积为25微升，其中10×buffer2.5微升，25mM MgCl₂1.5微升，4pmol/微升引物对2.5微升，2.5mM dNTPs2微升，5单位/微升Taq酶0.2微升，模板DNA20纳克，加水至25微升。反应程序为DNA95℃预变性5min；95℃预变性30s，50℃退火30s，72℃延伸展30s，循环35次；最后72℃延伸10min。