[发明专利]一种碳酸钙微球-细胞外基质复合材料及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201310605594.4 | 申请日： | 2013-11-26 |
| 公开（公告）号： | CN103611193A | 公开（公告）日： | 2014-03-05 |
| 发明（设计）人： | 龚逸鸿;许哲武;徐勇;李燕;张志光;蒋庆 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | A61L27/44 | 分类号： | A61L27/44 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 陈卫 |
| 地址： | 510275 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 碳酸钙 细胞 基质 复合材料 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种碳酸钙微球-细胞外基质复合材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1. 分别配制浓度为10mM~250mM钙盐水溶液和10mM~250mM碳酸盐水溶液；
S2. 将步骤S1制得的钙盐水溶液和碳酸盐水溶液搅拌混合、静置，将沉淀过滤、洗涤、干燥即得碳酸钙微球；
S3. 将S2得到的碳酸钙微球称量60mg~70mg平铺在细胞培养容器中，用培养基浸泡，然后接种骨髓间充质干细胞，于CO2培养箱中培养5~10天，每隔2~3天更换培养基，接着进行脱细胞处理，最后干燥即可得到碳酸钙微球-细胞外基质复合材料。
2. 根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤S2中所述钙盐水溶液和碳酸盐水溶液混合时钙离子和碳酸根离子的摩尔比为1:1。
3. 根据权利要求1或2所述制备方法，其特征在于，所述钙盐为氯化钙或硝酸钙；所述碳酸盐为碳酸钠或碳酸钾。
4. 根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤S2中所述干燥为冷冻干燥，冷冻干燥时间为24~72小时。
5. 根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤S3中接种骨髓间充质干细胞的密度为10000~30000/cm2，所述骨髓间充质干细胞为人源P3代骨髓间充质干细胞。
6. 根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述脱细胞的步骤为：将细胞培养容器放入-80℃冰箱冷冻5~10min，接着取出解冻，用去离子水冲洗细胞培养容器表面，循环操作2~6次。
7. 根据权利要求6所述制备方法，其特征在于，所述解冻为室温解冻。
8. 一种根据权利要求1所述制备方法制备得到的碳酸钙微球-细胞外基质复合材料。
9. 权利要求1所述制备方法制备得到的碳酸钙微球-细胞外基质复合材料在间充质干细胞体外培养中的应用。
10. 根据权利要求9所述应用，其特征在于，所述体外培养为细胞增殖、分化或迁移。
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