[发明专利]一种生长激素释放因子衍生物的合成方法

权利要求书

1.一种合成CJC-1295的方法，包括下述步骤：

（1）以氨基树脂为载体与Fmoc-Lys(Tfa)-OH合成Fmoc-Lys(Tfa)-树脂，然后采用固相多肽合成方法将其从C端到N端逐一偶联上待偶联的氨基酸，得到肽树脂A:

Boc-Tyr(tBu)-dAla-Asp(OtBu)-Ala-Ile-Phe-Thr(tBu)-Gln(Trt)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Val-Leu-Ala-Gln(Trt)-L eu-Ser(tBu)-Ala-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Leu-Leu-Gln(Trt)-Asp(Ot Bu)-Ile-Leu-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Lys(Tfa)-树脂；

（2）用氨水和DMF的混合物将步骤（1）中得到的肽树脂A上的Lys的保护基团去除，得到肽树脂B：

Boc-Tyr(tBu)-dAla-Asp(OtBu)-Ala-Ile-Phe-Thr(tBu)-Gln(Trt)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Val-Leu-Ala-Gln(Trt)-L eu-Ser(tBu)-Ala-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Leu-Leu-Gln(Trt)-Asp(Ot Bu)-Ile-Leu-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Lys-树脂；

（3）通过缩合剂将3-马来酰亚胺基丙酸与所述肽树脂B偶联，得到肽树脂C；

Boc-Tyr(tBu)-dAla-Asp(OtBu)-Ala-Ile-Phe-Thr(tBu)-Gln(Trt)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Val-Leu-Ala-Gln(Trt)-L eu-Ser(tBu)-Ala-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Leu-Leu-Gln(Trt)-Asp(Ot Bu)-Ile-Leu-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Lys(MPA)-树脂；

（4）将肽树脂C裂解得到CJC-1295:

H-Tyr-dAla-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Gln-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Ala-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Leu-Ser-Arg-Lys(MPA)-NH₂。

2.权利要求1的方法，其中，步骤（1）中的氨基树脂为Rink-Amide-MBHA树脂、Rink-Amide树脂、Rink-Amide-AM树脂或Sieber酰胺树脂；所述氨基树脂的替代度为0.2mmol/g～0.5mmol/g。

3.权利要求1的方法，其中，步骤（1）中Fmoc-Lys(Tfa)-树脂与待偶联的氨基酸的摩尔比为1:(2～5)，优选为1:3。

4.权利要求1的方法，其中，步骤（1）中的固相多肽合成方法在偶联剂的存在下进行，所用的偶联剂为DIPCDI/HOBt、PyBOP/HOBt/DIPEA、TBTU/HOBt/DIPEA或HBTU/HOBt/DIPEA，优选HBTU、HOBt和DIPEA的组合物，其中各成分的比例以摩尔比计为HOBt:HBTU:DIPEA=1:1:1～1.5，优选为HOBt:HBTU:DIPEA=1:1:1.5；且待偶联的氨基酸与HOBt的摩尔比为1:(1～2)。

5.权利要求1的方法，其中，在步骤（1）中待偶联的氨基酸与HOBt的摩尔比为1:(1～2)。

6.权利要求1的方法，其中，步骤（2）中所述混合物中氨水和DMF的体积比为1:5～20，优选为1:10。

7.权利要求1的方法，其中，步骤（3）中3-马来酰亚胺基丙酸与肽树脂B的摩尔比为1:(2～5)，优选1:3。

8.权利要求1的方法，其中，步骤（3）在偶联剂的存在下进行，所用的偶联剂为HBTU、HOBt和DIPEA的组合物，且3-马来酰亚胺基丙酸、HOBt、HBTU和DIPEA的摩尔比为1:(1～2):(1～2):(1～3)。