[发明专利]灰树花发酵胞外多糖发酵液的新用途

权利要求书

1.一种灰树花发酵胞外多糖发酵液在制备防治禽病毒性疾病的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的灰树花发酵胞外多糖发酵液的新用途，其特征在于：所述灰树花发酵胞外多糖发酵液是通过下述方法得到的：

（1）种子活化：将马铃薯葡萄糖琼脂培养基制成平板，即得PDA平板培养基，将灰树花菌株用接种铲分别挖取黄豆大小菌丝体1块转接在PDA平板培养基上，24～28℃，恒温培养15～20d，待菌丝体长出后，存于4℃冰箱备用；

（2）种子培养：采用250mL挡板三角瓶，装液量50-80mL，高压常规灭菌后，每瓶用接种铲接种黄豆大小的已活化的菌丝体10块，24-28℃，150r/min培养4-5d；

（3）摇瓶发酵培养：采用500mL挡板三角瓶，装液量100mL，高压常规灭菌后，用破口的10mL移液价吸取10%种子液(即从100mL种子液中吸取含有10块菌丝体的种子液)移入以上角瓶，24～28℃，150r/min培养6～8d；

（4）发酵液处理：发酵结束后，将发酵液3000r/min离心20min，上清过0.22微米滤膜除菌后于4度冰箱保存即可。

3.根据权利要求2所述的灰树花发酵胞外多糖发酵液的新用途，其特征在于：所述各步骤中所用到的培养基具体组成如下：

PDA平板培养基：每200g土豆中葡萄糖20g，蛋白胨5g，KH₂PO₄2g，MgSO₄1g，VB₁10mg，琼脂20g，所述PDA平板培养基是由下述方法配制而成的：将每200g土豆去皮芽眼，切成小条放入锅中，加1L水煮沸20-30min左右至土豆软而不烂时，用6-8层纱布过滤，然后加入葡萄糖20g，蛋白胨5g，KH₂PO₄2g，MgSO₄1g，VB₁10mg，琼脂20g，补水至1L，121℃灭菌20min。

发酵培养基：每22g葡萄糖中蛋白胨3g，KH₂PO₄0.8g，VB1，0.12g，所述发酵培养基是由下述方法制备而成的：将每22g葡萄糖配蛋白胨3g，KH₂PO₄0.8g，VB₁0.12g溶解于500mL蒸馏水，然后定容至1L，121℃灭菌20min。

4.根据权利要求2所述的灰树花发酵胞外多糖发酵液的新用途，其特征在于：所述步骤（1）中单菌落培养温度为25℃。

5.根据权利要求2所述的灰树花发酵胞外多糖发酵液的新用途，其特征在于：所述步骤（2）中装液量60mL。

6.根据权利要求2所述的灰树花发酵胞外多糖发酵液的新用途，其特征在于：所述步骤（3）中发酵时间为7d。