[发明专利]灰树花发酵胞外多糖发酵液的新用途

说明书

技术领域

本发明涉及禽病毒性疾病防治领域，尤其是一种灰树花发酵胞外多糖发酵液的新用途。

背景技术

随着社会的发展和经济的繁荣以及人类健康观念的改变，回归自然、天人合一的观念越来越受到推崇，“餐桌安全”受到了极大的关注，人们对饮食安全的要求也愈来愈高。在禽疾病中，病毒感染对禽养殖业造成的损失是具大的。鸡传染性法氏囊病、鸡新城疫病、鸡传染性支气管炎是危害养禽业的三大主要疫病，在一些养鸡比较密集地区，已取代非典型性鸡新城疫而居传染病发病率的首位，不分品种，蛋鸡、肉鸡、肉杂鸡；不管免疫与否，均有可能发病，这些病引起雏鸡的免疫抑制，使病鸡对大肠杆菌、腺病毒、沙门氏菌、鸡球虫等病原体更易感，对马立克疫曲、鸡传染性法氏囊病疫苗等接种的反应能力下降，因此该病对养鸡业造成了巨大的危害。在预防禽感染性疾病时，多采用抗生素，但抗生素的滥用给禽产品的食用带来了极大的饮食隐患，药物残留已经成为影响禽产品安全的主要因素之一。

如何找到一种对病毒病原体有直接杀灭或抑制作用，同时通过调节禽的机体内在的抗病原体机制（如免疫系统、补体系统等）来选到抑杀病毒的作用是亟待解决的一个问题。

灰树花是一种珍贵的天然真菌，又名贝叶多孔菌、千佛菌、栗干蘑、云蕈、莲花菌等。灰树花含有多种生理活性物质，如多糖(糖蛋白)、核酸、多酚等，其中，灰树花多糖(糖蛋白复合体)是研究的重点。真菌多糖是继核酸和蛋白质之后的另一种有待深入研究的生物大分子物质。药用真菌多糖是主要存在于菌丝体细胞内分泌到细胞外的大分子物质，是很好的免疫调节增强剂，可以从根本上提高机体免疫功能。灰树花多糖的主要单糖组成为D-葡聚糖，此外还可能含有少量的D-木糖、D-甘露糖、D-岩藻糖、L-阿拉伯糖、龙胆二糖、半乳糖等。具有生物活性的灰树花多糖的基本结构是带有β-(l-6)侧链的β-(l-3)-D-葡聚糖，分支度约为33%，灰树花多糖的药理活性与组分中基本结构的含量有关。目前，灰树花多糖抗肿瘤作用的药效、药理研究很多，灰树花多糖作为抗肿瘤作用已经在市场中生产和销售。但有关灰树花发酵胞外多糖发酵液在临床中用于抗禽病毒性疾病的研究和产品研发从未见有报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种灰树花发酵胞外多糖发酵液的新用途。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种灰树花发酵胞外多糖发酵液在制备防治禽病毒性疾病的药物中的应用。

优选的，上述灰树花发酵胞外多糖发酵液的新用途，所述灰树花发酵胞外多糖发酵液是通过下述方法得到的：

（1）种子活化：将马铃薯葡萄糖琼脂培养基按常规方法制成平板，即得PDA平板培养基，将灰树花菌株（原始菌种来源：中国普通微生物保藏管理中心）用接种铲分别挖取黄豆大小菌丝体1块转接在PDA平板培养基上，24～28℃，恒温培养15～20d，待菌丝体长出后，存于4℃冰箱备用；

（2）种子培养：采用250mL挡板三角瓶，装液量50-80mL，高压常规灭菌后，每瓶用接种铲接种黄豆大小的已活化的菌丝体10块，24-28℃，150r/min培养4-5d；

（3）摇瓶发酵培养：采用500mL挡板三角瓶，装液量100mL，高压常规灭菌后，用破口的10mL移液价吸取10%种子液(即从100mL种子液中吸取含有10块菌丝体的种子液)移入以上角瓶，24～28℃，150r/min培养6～8d；

（4）发酵液处理：发酵结束后，将发酵液3000r/min离心20min，上清过0.22微米滤膜除菌后于4度冰箱保存即可。

优选的，上述灰树花发酵胞外多糖发酵液的新用途，所述各步骤中所用到的培养基具体组成如下：

PDA平板培养基（L^-1）：每200g土豆中葡萄糖20g，蛋白胨5g，KH₂PO₄2g，MgSO₄1g，VB₁10mg，琼脂20g，pH自然，所述PDA平板培养基是由下述方法配制而成的：将每200g土豆去皮芽眼，切成小条放入锅中，加1L水煮沸20-30min左右至土豆软而不烂时，用6-8层纱布过滤，然后加入葡萄糖20g，蛋白胨5g，KH₂PO₄2g，MgSO₄1g，VB₁10mg，琼脂20g，补水至1L，121℃灭菌20min。