[发明专利]大兴安岭野生泽漆总黄酮的制备方法

权利要求书

1.一种采用超高压提取技术，聚酰胺联用大孔树脂吸附，再用高速逆流色谱分离纯化，得到高纯度总黄酮的方法，其步骤如下：

（1）超高压提取：泽漆全草切断，以不同浓度离子液体溶液为溶剂，在一定料液比、适当超高压力下处理几分钟；

（2）精滤处理：采用聚四氟乙烯膜，过滤精度0.1μm，在一定温度和压力下精滤处理；

（3）聚酰胺树脂吸附及洗脱：

采用一定目数的聚酰胺粉末，控制上样液浓度，上样液体积,室温下以一定流速吸附饱和；解吸时先除杂，再用一定浓度的乙醇溶液解吸，控制流速,收集洗脱液，检测总黄酮含量；

（4）大孔树脂二次吸附及洗脱：

选用不同型号的大孔树脂，控制上样液质量浓度，上样速率；先用2 BV去离子水冲洗树脂，再用不同浓度的乙醇溶液，以一定流速洗脱，收集洗脱液，检测总黄酮含量；

（5）真空冷冻干燥：收集总黄酮溶液，在适当温度、干燥压力下冷冻干燥；

（6）分相：称取总黄酮提取物，选择HSCCC溶剂系统，按比例将各种溶剂加入分液漏斗中，震荡使溶液充分混合，放置过夜，分相平衡后分出上相和下相；

（7）HSCCC纯化：以溶剂系统的上相为固定相，下相为流动相，调整转速，以一定流速泵入流动相，纯化黄酮提取物；

（8）检测：采用高效液相色谱法，紫外检测器在一定波长进行检测，泽漆总黄酮纯度为95% 以上；

其中，在所述的步骤（1）中，离子液体为1-辛基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑溴盐、1-羟乙基-3-甲基六氟磷酸盐中的任意一种，体积浓度为50-70%；

在所述的步骤（3）中，聚酰胺树脂为80-200目，上样液浓度控制在0.5-1.5 mg/mL，上样液体积2-3BV,室温下以2-4BV/h流速吸附饱和；解析时除杂水2-4BV，乙醇解析浓度为75-85%，洗脱体积4-6 BV，流速2-4BV/h；

在所述的步骤（4）中，大孔树脂为D312、DM130、D101中的任意一种；上样液质量浓度为3-4.5mg/ml，上样速率2-4BV/h，上样体积4-6 BV/h；洗脱时乙醇溶液浓度为80-90%，洗脱流速为1-3BV/h，洗脱体积为5-7 BV；

在所述的步骤（5）中，总黄酮溶液预冻温度为-15℃至-25℃，工作压力20-30Pa，升华温度50-55℃，解析温度60-65℃；

在所述的步骤（6）中，溶剂为比例是4：1：3的乙酸乙酯-甲醇-水、比例是5：:3：2：4的正己烷-醋酸乙酯-乙醇-水、比例是4：3：2：1的氯仿-甲醇-丁醇-水中的任意一种；

在所述的步骤（7）中，转速700-850 r/min，流速为2.0-3.0 mL/min。