[发明专利]一种利用猪小肠制备肝素钠的方法无效
申请号: | 201310632804.9 | 申请日: | 2013-11-25 |
公开(公告)号: | CN103755837A | 公开(公告)日: | 2014-04-30 |
发明(设计)人: | 刘乃山;尚明彩;迟培升;夏衬来 | 申请(专利权)人: | 青岛九龙生物医药有限公司 |
主分类号: | C08B37/10 | 分类号: | C08B37/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 小肠 制备 肝素钠 方法 | ||
1.一种利用猪小肠制备肝素钠的方法,其特征是:包括如下步骤:
(1)肠粘膜的制备:在猪小肠内灌入清水,用肠衣机挤压出小肠粘膜至粘膜池;
(2)酶解:用粘膜泵将粘膜从粘膜池打入酶解罐中,往酶解罐中加水,粘膜与水的重量比为1∶7-9,搅拌均匀后加入2709碱性蛋白酶调节PH值为8-9,加热使温度达到55℃-60℃,再加入重量百分比为3%-5%的肠衣专用盐,测其盐度达到2%-2.5%,保温2-3小时,继续加热使温度达到80℃-85℃,保温30-40分钟后,用80目尼龙布过滤收集过滤液;
(3)吸附:将上述过滤液打入吸附罐中,搅拌,待温度降到58℃-60℃时加入树脂,搅拌8-10小时,继续冷却到40℃-45℃,放出废液,收集过滤树脂;
(4)洗脱:
(4-1):将收集的树脂反复冲洗后倒入洗脱器中,加入质量分数为5%-7%的盐水温度保持在50℃-55℃,搅拌30-40分钟;
(4-2):随后将废液倒掉,加入质量分数为20%-24%的盐水,温度保持在50℃-55℃,搅拌3-4小时后,收集洗脱液;
(4-3):重复(4-2)的步骤,将两次收集的洗脱液合并待用;
(5)沉淀脱盐:
将上述洗脱液过滤移入沉淀罐中,边搅拌边加入质量分数为80%-85%的乙醇,调PH值至7-8,搅匀密封沉淀23-25小时,虹吸上层清液用于回收乙醇,收集沉淀物待用;
(6)脱水干燥:将上述沉淀物滤干脱水,放入烘箱干燥后即得肝素钠。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征是:步骤(2)酶解中粘膜与2709碱性蛋白酶的重量比为500∶1。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征是:步骤(3)吸附中树脂的添加量按每根猪小肠加入20-30克树脂的比例添加。
4.根据权利要求1所述的制备方法其特征是:步骤(4-1)中树脂与加入的质量分数为5%-7%盐水的重量比为1∶1.1-1.3,步骤(4-2)中树脂与加入的质量分数为20%-24%盐水的重量比为1∶1.1-1.3。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征是:步骤(4-3)收集完洗脱液后,再接着加入质量分数为20%-24%的盐水,温度保持在50℃-55℃,搅拌30-40分钟后,收集洗脱液做高浓度盐水循环使用。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征是:步骤(5)沉淀脱盐中搅拌加入预冷过的乙醇。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征是:步骤(5)沉淀脱盐中洗脱液与乙醇的体积比为1∶1.8-2.2。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征是:步骤(6)的脱水干燥中烘箱的温度为80℃-90℃,干燥时间为6-8小时。
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