[发明专利]一种脂肪乳剂及其制备方法及其应用及方法、以及一种血栓形成前状态动物模型

权利要求书

1.一种脂肪乳剂，其特征在于，包括：胆固醇、猪油、胆酸钠、丙基硫氧嘧啶、吐温80、丙二醇和水。

2.如权利要求1中所述脂肪乳剂，其特征在于：主要组分的浓度为，胆固醇100g/L，猪油200g/L，胆酸钠20g/L，丙基硫氧嘧啶10g/L。

3.如权利要求1或2中所述脂肪乳剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

a、取80份猪油至容器中，加热至融化；

b、继续加入40份胆固醇并使之融化；

c、继续加入8份胆酸钠和4份丙基硫氧嘧啶，搅匀；

d、加入水、84-88份吐温80和83-84份丙二醇，搅匀；

e、继续加入水至主要组分达到设定的浓度。

4.如权利要求1或2中所述脂肪乳剂的在建立家兔血栓形成前状态动物模型中的应用。

5.如权利要求4中所述脂肪乳剂在建立家兔血栓形成前状态动物模型的应用，其特征在于：包括以下步骤：

1）家兔除给予普通饲料150g/只/天喂养外，还取所述脂肪乳剂按照2ml/kg·ｄ进行灌胃，每天一次，持续两周；

2）灌胃前后分别从耳中央动脉采血6ml，然后分别进行如下操作：

2.1）取其中3ml用20g/L EDTA-Na₂抗凝，2500r/min离心5min，取血浆低温冰箱保存，取部分红细胞测定：膜流动性（M-Flu）、E-MDA和E-SOD含量；

2.2）将剩下的红细胞测定M-TC含量；

2.3）取血浆放兔法测定TXB₂、6-Keto-PGF₁、ET、GMP-140、t-PA、PAI；

2.4）另采3ml直接离心测定血清TC、TG、APOAI、APOB、SOD；

2.5）另取部分动脉血测定PAF含量；

2.6）灌胃两周后处死动物做肉眼及光镜观察；

3）将灌胃前后测定的各项指标进行对比和分析。

6.如权利要求5中所述脂肪乳剂在建立家兔血栓形成前状态动物模型的应用，其特征在于：步骤2.1中，膜流动性（M-Flu）采用如下方法进行测定：

用PBS洗涤红血球2次配成4*10⁷细胞/ml浓度的红细胞悬液，按照1:1与DPH（荧光探针）标记液混匀，于25℃保温30min，离心弃去标记残液，用PBS洗涤细胞2次，再用PBS稀释成2ml悬液，在25℃下采用荧光光度计分别测定与激发偏振光振动方向平行、垂直时荧光偏振强度，根据公式计算出M-Flu。

7.如权利要求5中所述脂肪乳剂在建立家兔血栓形成前状态动物模型的应用，其特征在于：步骤2.2中，采用如下方法进行测定：

将剩下的红细胞用生理盐水洗涤后，溶于0.25nmol/L的CaCl₂溶液中，于4℃置30min至完全溶血，然后以1400r/min离心10min，去掉溶血液，沉淀物用PH值为7.4的0.01mmol/L磷酸盐缓冲液反复洗涤，再按所取的细胞体积加入50g/L氯化钠，先在超声波绞碎仪上超生匀浆再用500r/min的速度离心5min，以上清液10um测定红细胞M-TC含量。

8.一种血栓形成前状态动物模型，其特征在于：通过如下方法制备形成：给予家兔普通饲料150g/只/天喂养，并采用权利要求1或2中所述脂肪乳剂，按照2ml/kg·ｄ进行灌胃，每天一次，持续两周制备形成。