[发明专利]一种培养瓶及其制备方法及应用

权利要求书

1.一种培养瓶，包括瓶体、瓶盖、胶塞，其特征在于：所述瓶体内预分装有液体培养基，所述液体培养基中混悬有吸附树脂，所述瓶体内部底端贴敷一层传感膜，所述传感膜含有荧光指示剂及化学指示剂。

2.根据权利要求1所述的培养瓶，其特征在于：所述液体培养基为需氧菌、厌氧菌和真菌培养所需的胰酶大豆肉汤或脑心浸液培养成分，并添加微生物促生长因子。

3.根据权利要求1所述的培养瓶，其特征在于：所述吸附树脂为一种或多种非离子吸附树脂和弱酸性阳离子树脂。

4.根据权利要求1所述的培养瓶，其特征在于，所述传感膜为只允许分子量为200以下的物质通过的高分子半透膜。

5.根据权利要求4所述的培养瓶，其特征在于，所述传感膜，采用高分子硅橡胶材料制备。

6.根据权利要求1所述的培养瓶，其特征在于：所述荧光指示剂为荧光素类、罗丹明类、金属配合物类和卟啉类荧光物质中的任一种；所述化学指示剂为百里酚蓝、酚红、甲酚红、溴百里酚蓝中的任一种或多种。

7.根据权利要求6中所述的培养瓶，其特征在于：所述荧光指示剂和所述化学指示剂的组合包括：

0.01%-0.05%的罗丹明101、0.1%-0.5%的百里酚蓝；

0.02%-0.04%的罗丹明B、0.2%-0.4%的百里酚蓝；

0.01%-0.03%的罗丹明101、0.01%-0.05%的溴百里酚蓝；

0.02%-0.06%的铕配合物、0.03%-0.08%的溴百里酚蓝；

0.03%-0.05%的钌配合物、0.02%-0.04%的甲酚红，以上含量均为各组分在所述传感膜中的质量百分比。

8.根据权利要求1中所述培养瓶，其特征在于：所述瓶体为无色透明圆柱形塑料容器，采用聚酯材料制备而成；所述胶塞为丁基橡胶塞；所述瓶盖为双层铝制，顶层设有不同颜色的喷涂层；所述瓶内密闭空间为无菌环境，并含有混合气体，所述混合气体为氧气、氮气、氢气、二氧化碳中的两种或多种气体。

9.一种制造如权利要求1-8任一项所述的培养瓶的方法，其特征在于，包括以下步骤：

①传感膜的制备：

将荧光指示剂及化学指示剂分别用溶剂溶解稀释，分别适量加入液体高分子硅橡胶中，搅匀均匀，真空脱气15-20分钟，用设备按照每瓶3-4克质量灌注于空培养瓶底部，经20-24小时室温固化；

②液体培养基的制备：

用纯化水按比例溶解所需的胰酶大豆肉汤或脑心浸液等培养成分，并添加适当微生物促生长因子，高压湿热灭菌处理，冷却后分装于已制备好传感膜的空瓶内，每瓶40ml；

③吸附树脂的分装：

将灭菌处理后的非离子吸附树脂和弱酸性阳离子树脂按照配比混匀，按照每瓶1-2克质量灌注于已分装液体培养基的培养瓶内；

④封装：

用专用设备注入内置混合气体，压上预先灭菌的胶塞和瓶盖，锁死密封。

10.一种权利要求9所述制备方法制备的培养瓶在检测生物样品中的应用，其特征在于，检测对象为血液或体液中厌氧菌、需氧菌和真菌的含量。