[发明专利]一种检测淋巴细胞归巢受体的荧光方法及其试剂盒

权利要求书

1.一种检测淋巴细胞归巢受体的荧光方法，其特征在于该方法基于阳离子型水溶性共轭聚合物和透明质酸探针，包括以下步骤：

  1）制备荧光基团标记的透明质酸探针；

  2）将阳离子型水溶性共轭聚合物与所述透明质酸探针结合，进行荧光检测；

  3）在上述检测体系中再加入待检测的淋巴细胞归巢受体，透明质酸探针与淋巴细胞归巢受体CD44结合，再次进行荧光检测。

2.根据权利要求1所述的一种检测淋巴细胞归巢受体的荧光方法，其特征在于所述荧光基团包括荧光素的荧光小分子结构中的发色团。

3.根据权利要求1所述的一种检测淋巴细胞归巢受体的荧光方法，其特征在于所述阳离子型水溶性共轭聚合物，其荧光发射峰与荧光基团标记的透明质酸探针的紫外-可见吸收峰有光谱重叠，以便发生高效的荧光共振能量转移。

4.根据权利要求1所述的一种检测淋巴细胞归巢受体的荧光方法，其特征在于所述阳离子型水溶性共轭聚合物与透明质酸探针是通过静电吸引作用结合。

5. 根据权利要求1所述的一种检测淋巴细胞归巢受体的荧光方法，其特征在于所述透明质酸探针与CD44的结合，是透明质酸与CD44间发生特异性识别并结合的过程。

6. 根据权利要求1所述的一种检测淋巴细胞归巢受体的荧光方法，其特征在于检测体系中，所使用的缓冲溶液是0.05M Tris-HCl，pH= 8。

7. 根据权利要求1所述的一种检测淋巴细胞归巢受体的荧光方法，其特征在于检测体系的温度为25°C。

8.根据权利要求1所述的一种检测淋巴细胞归巢受体的荧光方法，其特征在于加入待测CD44溶液5分钟后再次测量荧光发射光谱。

9. 根据权利要求1所述的一种检测淋巴细胞归巢受体的荧光方法，其特征在于所述的荧光检测是用荧光分光光度计进行检测，激发波长在阳离子型水溶性共轭聚合物最大紫外-可见吸收峰处，发射波长扫描范围为415－600nm。

10.一种用于权利要求1、2、3、4、5、6、7、8或9所述检测淋巴细胞归巢受体的荧光方法的试剂盒，其特征在于该试剂盒为：

将荧光基团标记的透明质酸探针与阳离子型水溶性共轭聚合物按摩尔浓度1:50的配比制成的混合物，构成检测CD44的试剂盒。