[发明专利]神经干细胞来源Exosomes制备及在神经系统疾病中的应用

权利要求书

1.一种神经干细胞来源的胞外体，其特征在于：所述胞外体具有神经干细胞的非特异性成分和神经干细胞内特殊的蛋白质、mRNA、microRNA及DNA碎片等活性物质，是一种亚细胞结构的复合信息体。

2.根据权利要求1所述的胞外体，其特征在于：所述胞外体的来源的神经干细胞包括人脐带间充质干细胞诱导的神经干细胞和大鼠神经干细胞。

3.如权利要求1－2所述的胞外体，其特征在于所述胞外体含有神经干细胞细胞表面标记CD133、Nestin，同时包含其自身表面标记CD63。

4.如权利要求1－3所述的胞外体的制备方法，其特征在于：制备神经干细胞的条件培养基，在4℃条件下配伍使用用超速离心法与微孔滤膜，分离提取胞外体（Exosomes），其具体步骤如下：在无菌条件下，收集3-10代各类型干细胞的完全培养基上清液进行离心，20 000g*20min，收集上清液，经0.22 μm无菌滤膜过滤除杂，将得到的液体再次离心，120 000g*60min，弃上清，取沉淀，得到Exosomes。

5.如权利要求4所述胞外体的制备方法，其特征在于该制备方法还包括纯化步骤，具体为使用免疫磁珠法高效提纯胞外体，对胞外体进行CD9⁺、CD63⁺ 、CD133⁺亚群的分离。

6.如权利要求1－2所述的胞外体在制备治疗神经系统疾病药物中的应用，其特征在于：所述胞外体具有完整胞膜且携带胞质及胞膜中各类活性蛋白及信号分子的囊状小体，可部分或全部发挥神经干细胞的作用。

7.如权利要求6所述的胞外体在制备治疗神经系统疾病药物中的应用，其特征在于：所述神经系统疾病为大脑中动脉局灶性脑缺血。