[发明专利]一种高毒性、高增值能力的人D-CIK细胞的专用试剂盒无效
申请号: | 201310651747.9 | 申请日: | 2013-12-04 |
公开(公告)号: | CN103756960A | 公开(公告)日: | 2014-04-30 |
发明(设计)人: | 马飞;魏宗科;朱利军 | 申请(专利权)人: | 深圳市合一康生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 518057 广东省深圳市南山区高新区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 毒性 增值 能力 cik 细胞 专用 试剂盒 | ||
1.一种高毒性、高增值能力的人D-CIK细胞制备的专用试剂盒,其特征在于,包括:
(1)单核细胞分离获取培养基;
(2)促DC诱导分化培养基;
(3)促DC成熟剂;
(4)肿瘤抗原;
(5)强化细胞毒活性培养基;
(6)细胞激活增值培养基;
(7)CD3+CD8+T淋巴细胞诱导分化培养基;
(8)细胞扩增培养基。
2.根据权利要求1所述一种高毒性、高增值能力的人D-CIK细胞制备的专用试剂盒,其特征在于,所述单核细胞分离获取培养基为PAATM培养基、GT-T551TM培养基、Opti-MEMTM培养基、RPMI-1640培养基中的任意一种。
3.根据权利要求1或2所述一种高毒性、高增值能力的人D-CIK细胞制备的专用试剂盒,其特征在于,所述促DC诱导分化培养基的溶剂为X-VIVO-15TM培养基或者AIM-VTM培养基中任意一种,溶质为GM-CSF和IL-4,其中GM-CSF的浓度是800-1000IU/ml,IL-4的浓度是800-1000IU/ml。
4.根据权利要求3所述一种高毒性、高增值能力的人D-CIK细胞制备的专用试剂盒,其特征在于,所述促DC成熟剂的溶剂为X-VIVO-15TM培养基或者AIM-VTM培养基中任意一种,溶质为IL-1β、IL-6、TNF-α,或者IL-1β、IL-6、TNF-α与IFN-γ、Mtb-Hag中的一种或者两种,该促DC成熟剂加入到培养体系后,IL-1β终浓度为8-15ng/mL,IL-6终浓度为50-150ng/mL,TNF-α终浓度为8-15ng/mL,Mtb-Hag终浓度为5~10μg/ml,IFN-γ终浓度为100~1000IU/ml。
5.根据权利要求1或2或4所述一种高毒性、高增值能力的人D-CIK细胞制备的专用试剂盒,其特征在于,所述肿瘤抗原为下述抗原中的一种或多种:CD19、CD20、WT-1、MUC1、LMP2、HPV E6E7、EGFRvIII、HER-2/neu、Idiotype、MAGE A3、p53、NY-ESO-1、PSMA、GD2、CEA、MelanA/MART1、Ras mutant、gp100、p53mutant、Proteinase3、bcr-abl、Tyrosinase、Survivin、PSA、hTERT、Sarcoma、EphA2、PAP、ML-IAP、AFP、EpCAM、ERG、NA17、PAX3、ALK、Androgen receptor、Cyclin B1、Polysialic acid、MYCN、RhoC、TRP-2、GD3、Fucosyl GM1、Mesothelin、PSCA、MAGE A1、sLe(animal)、CYP1B1、PLAC1、GM3、BORIS、Tn,该抗原加入培养体系后浓度是1~20μg/ml。
6.根据权利要求5所述一种高毒性、高增值能力的人D-CIK细胞制备的专用试剂盒,其特征在于,所述强化细胞毒活性培养基的溶剂为PAATM培养基、GT-T551TM培养基、Opti-MEMTM培养基、RPMI-1640培养基中的任意一种,溶质为IFN-γ,其中IFN-γ的浓度为800-1000IU/ml。
7.根据权利要求1或6所述一种高毒性、高增值能力的人D-CIK细胞制备的专用试剂盒,其特征在于,所述细胞激活增值培养基的溶剂为PAATM培养基、GT-T551TM培养基、Opti-MEMTM培养基、RPMI-1640培养基中的任意一种,溶质包括抗CD3单抗、抗CD28单抗、IL-1α与IL-2中的一种或者几种,其中抗CD3单抗浓度为50~500ng/ml,抗CD28单抗的浓度为50~500ng/ml,IL-1α的浓度为0.5~5ng/ml,IL-2的浓度为50~1000IU/ml。
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