[发明专利]一种用于检测敏化硝酸纤维素膜上抗体的胶体金膜及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于检测敏化硝酸纤维素膜上抗体的胶体金膜，该敏化硝酸纤维素膜上设有包被质控抗体的质控线和包被捕获抗体的检测线，其特征在于，该胶体金膜包括含有胶体金探针的金标垫，PVC胶板、滤样纸和金探针复溶液；在PVC胶板上依次叠合有滤样纸，含有胶体金探针的金标垫，以及待检敏化硝酸纤维素膜；金探针复溶液滴加在滤样纸上。

2.如权利要求1所述的胶体金膜，其特征在于，所述金标垫是包被金探针的玻璃纤维；所述含有胶体金探针的金标垫为兔抗体金标垫或羊抗鼠抗体金标垫；所述兔抗体金标垫是兔多克隆抗体标记的金探针包被在玻璃纤维上，所述羊抗鼠抗体金标垫是羊抗鼠多克隆抗体标记的金探针包被在玻璃纤维上。

3.如权利要求1所述的胶体金膜，其特征在于，所述胶体金探针采用胶体金颗粒与抗体分子通过物理吸附的作用偶联结合。

4.如权利要求3所述的胶体金膜，其特征在于，所述胶体金颗粒直径在20-60nm。

5.如权利要求3所述的胶体金膜，其特征在于，所述抗体分子是兔多克隆抗体或羊抗鼠多克隆抗体。

6.如权利要求1所述的胶体金膜，其特征在于，所述金探针复溶液包括如下重量百分比的组分：

Triton X-100    0.05%；

NaH₂PO₄·2H₂O    0.38%；

Na₂HPO₄·12H₂O   2.95%；

该金探针复溶液的pH=8.0±0.1。

7.一种如权利要求1-6任一项所述的胶体金膜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）胶体金颗粒的制备；

（2）金探针复溶液的配制；

（3）金探针的制备：取胶体金溶液，用0.1M碳酸钾溶液调整其PH为8.0-8.4，加入抗体，继续搅拌30分钟，加入终浓度为1%的牛血清白蛋白，继续搅拌30分钟，4℃11000RTC转速离心，弃上清，沉淀用金探针复溶液重悬，2-8℃保存备用；

（4）金探针稀释液的配制；

（5）金标垫溶液的配制；测量上述步骤（3）制备的胶体金探针OD530值，用金探针稀释液稀释至OD530为1-2；

（6）金标垫的制备：将玻璃纤维浸泡在上述步骤（5）制备的金标垫溶液中，待玻璃纤维完全湿润后取出，37℃烘干后室温密封保存备用；

（7）胶体金膜由滤样纸和PVC胶板及步骤（6）制得的金标垫和步骤（2）制得的金探针复溶液所组成。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，

步骤（2）中，所述金探针复溶液包括如下重量百分比的组分：

Triton X-100    0.05%；

NaH₂PO₄·2H₂O    0.38%；

Na₂HPO₄·12H₂O   2.95%；

该金探针复溶液的pH=8.0±0.1。

步骤（4）中，所述金探针稀释液包括以下质量百分比的组分：

pH=8.0±0.1。

9.如权利要求1-6任一项所述的胶体金膜在敏化硝酸纤维素膜检测中的应用，其特征在于，所检测的敏化硝酸纤维素膜为在敏化硝酸纤维素膜启始生产时剪切下来的一小段敏化硝酸纤维素膜。

10.如权利要求9所述的胶体金膜在敏化硝酸纤维素膜检测中的应用，其特征在于，所述检测过程是当开始生产敏化硝酸纤维素膜时，将起始一小段敏化硝酸纤维素膜剪下，使用权利要求1-6任一项所述的胶体金膜检测，即先将裁剪下来的敏化硝酸纤维素膜粘贴在PVC胶板上，再将金标垫和滤样纸依次粘贴在此PVC胶板上，然后裁剪成试纸条，在试纸条的滤样纸上滴加金探针复溶液，3-5分钟内观察敏化硝酸纤维素膜上质控线和检测线的显色情况，以此判断敏化硝酸纤维素膜上质控抗体和捕获抗体位置是否对调、两种抗体是否被相互污染。