[发明专利]一种治疗库欣病的多肽药物的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种治疗库欣病的多肽药物的制备方法，尤其涉及一种帕瑞肽的制备方法。

背景技术

库欣病是一种危及病人生命的罕见病，由于垂体肿瘤刺激导致促肾上腺皮质激素（ACTH）大量分泌，从而刺激肾上腺生长和分泌大量皮质醇，导致病人出现体重增加（特别在面部和颈部）、皮肤易擦伤、面部汗毛重、肌肉和骨骼变弱、血压升高等症状。手术切除肿瘤是治疗库欣病的有效方法，但手术不能治愈的病人，此前没有获得批准的专治药物。目前许多治疗库欣病的药均属于超适应证使用。

帕瑞肽，英文名为pasireotide diaspartate，其结构为：

帕瑞肽由瑞士诺华制药有限公司制造，是一种能与多受体结合的生长抑素类似物，与生长抑素受体sst1～3和sst5有高结合力。帕瑞肽能抑制GHI，GF-I和ACTH的分泌，提示其可能用于肢端肥大症与库欣病的治疗。其中帕瑞肽与生长抑素受体给合后，可阻止ACTH的释放，从而降低血液中的皮质醇水平，减轻库欣病的症状。临床研究证明，用900μg帕瑞肽，有41%的病人尿液中的皮质醇水平至少降低50%；用600μg帕瑞肽，有34%的病人尿液中的皮质醇水平至少降低50%。美国食品药品监督管理局（FDA）已于2012年11月14日批准了了新“孤儿药”Signifor(帕瑞肽,pasireotide diaspartate)注射液用于治疗不能通过手术治疗的库欣病(Cushing’s disease)患者。因此帕瑞肽具有很高的药用价值和广阔的市场前景。

公开号为CN1446229A的专利中公开了帕瑞肽的合成工艺，通过先制备特殊原料Fmoc-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-BOC)-OH，然后采用固相方法进行链的合成，最后裂解，在液相中进行环化，最终得到帕瑞肽。然而上述方法需要预先合成特殊原料Fmoc-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-BOC)-OH，然后通过固液相结合方法进行合成，存在反应步骤多，工艺繁琐，特殊原料不易得，不利于大规模生产等缺点。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是针对现有技术的缺陷，提供一种帕瑞肽的制备方法，所述制备方法步骤少、帕瑞肽的收率高、适合于帕瑞肽的大规模生产，同时制得的帕瑞肽纯度高。

为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

一种帕瑞肽的制备方法，包括：

步骤1：将Fmoc-Lys-OAll与固相载体偶联，得到Fmoc-Lys(Resin)-OAll；

步骤2：Fmoc-Lys(Resin)-OAll逐一偶联Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Ph g-OH和Fmoc-Pro(4-OH)-OH，得到Fmoc-Pro(4-OH)-Phg-D-Trp(Boc)-Lys(CTC)-OAll；

步骤3：Fmoc-Pro(4-OH)-Phg-D-Trp(Boc)-Lys(Resin)-OAll与Boc-NH-C₂H₄-NH-COOH偶联得到Fmoc-Pro(4-OCO-NH-C₂H₄-NH-Boc)-Phg-D-Trp(Boc)-Lys(CTC)-OAll；

步骤4：Fmoc-Pro(4-OCO-NH-C₂H₄-NH-Boc)-Phg-D-Trp(Boc)-Lys(CTC)-OAll依次偶联Fmoc-Phe-OH和Fmoc-Tyr(Bzl)-OH得到NH₂-Tyr(Bzl)-Phe-Pro(4-OCO-NH-C₂H₄-NH-Boc)-Phg-D-Trp(Boc)-Lys(Resin)-OAll，脱除C端的保护基团-All后环化得到帕瑞肽树脂；

步骤5：帕瑞肽树脂裂解得到帕瑞肽粗肽；

步骤6：帕瑞肽粗肽纯化得到帕瑞肽。

优选的，步骤1所述固相载体为Trt Resin或2-CTC Resin。

优选的，步骤1所述Fmoc-Lys(Resin)-OAll的替代度为0.4～0.6mmol/g。

优选的，步骤1所述偶联的偶联剂为二异丙基乙胺。

优选的，步骤2所述偶联的偶联剂为DIC/HOBt。

优选的，步骤3所述与Boc-NH-C2H4-NH-COOH偶联的偶联剂为DIC/HOBt/DMAP。