[发明专利]醋酸可的松转化中固定化细胞和环糊精循环利用的方法有效
| 申请号： | 201310665015.5 | 申请日： | 2013-12-09 |
| 公开（公告）号： | CN103695520B | 公开（公告）日： | 2017-06-27 |
| 发明（设计）人： | 申雁冰;王敏;王芳;梁静婷;骆健美;郑宇 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12P33/02 | 分类号： | C12P33/02;C12R1/06 |
| 代理公司： | 北京鼎佳达知识产权代理事务所(普通合伙)11348 | 代理人： | 王伟锋 |
| 地址： | 300458 天津市滨海*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 醋酸 可的松 转化 固定 细胞 环糊精 循环 利用 方法 | ||
1.一种醋酸可的松转化中固定化细胞和环糊精循环利用的方法，其特征在于：在以醋酸可的松为底物，环糊精为促溶剂，固定化细胞为催化剂的生物催化反应体系中，反应结束后，将含有环糊精的转化液粗过滤回收固定化细胞，并将粗过滤后的滤液经离心过滤、有机溶剂萃取后，所得的含有环糊精的萃余相除去残留有机溶剂，测定水相中环糊精的剩余量，计算环糊精的补加量，按补加量加入环糊精后的水相和回收的固定化细胞重新用于醋酸可的松的生物催化中；所述的有机溶剂选自乙酸乙酯、三氯甲烷或二氯甲烷；
当有机溶剂为乙酸乙酯时，与滤液的体积比为2：1；
当有机溶剂为三氯甲烷时，与滤液的体积比为6:1；
当有机溶剂为二氯甲烷时，与滤液的体积比为3:1。
2.根据权利要求1所述的醋酸可的松转化中固定化细胞和环糊精循环利用的方法，其特征在于：所述的环糊精为α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、羟乙基-β环糊精、羟丙基-β-环糊精、羟丁基-β-环糊精、磺丁基-β-环糊精、葡萄糖基胺基-β-环糊精、甲基-β-环糊精或羟丙基-γ-环糊精中的一种。
3.根据权利要求1所述的醋酸可的松转化中固定化细胞和环糊精循环利用的方法，其特征在于：所述的转化液粗过滤采用纱布或20-50目的筛网进行过滤。
4.根据权利要求1所述的醋酸可的松转化中固定化细胞和环糊精循环利用的方法，其特征在于：萃取次数为1-7次。
5.根据权利要求1所述的醋酸可的松转化中固定化细胞和环糊精循环利用的方法，其特征在于：所述的除去残留有机溶剂的方法为蒸馏、精馏中的一种或多种。
6.根据权利要求5所述的醋酸可的松转化中固定化细胞和环糊精循环利用的方法，其特征在于：所述的除去残留有机溶剂的方法为减压蒸馏。
7.根据权利要求1所述的醋酸可的松转化中固定化细胞和环糊精循环利用的方法，其特征在于：所述的固定化细胞为固定化简单节杆菌、固定化球形节杆菌。
8.根据权利要求1所述的醋酸可的松转化中固定化细胞和环糊精循环利用的方法，其特征在于：所述环糊精的测定方法为采用参数为4.6mm×250mm,5μm的Phenomenex Luna NH2 100 A色谱柱，流动相为乙腈-水＝60:40(v/v)，流速1.0mL/min，RID示差折光检测器,进样量20μL,柱温30℃。
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