[发明专利]一种检测清热灵颗粒中黄芩苷、连翘苷、靛玉红和甘草酸含量的方法

权利要求书

1.一种检测清热灵颗粒中黄芩苷、连翘苷、靛玉红和甘草酸含量的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

（1）制备待测样品：将清热灵颗粒研细混匀后加入体积浓度0～100%乙醇水溶液a中，制成混合液a，将混合液a在超声频率25KHz、超声功率80～100W的条件下超声处理10～30分钟，冷却后取超声处理后的混合液a加入体积浓度0～100%乙醇水溶液b补足重量，制成混合液b，使混合液b与混合液a的质量相同，将混合液b摇匀、过滤，取滤液，获得待测样品；所述乙醇水溶液b与乙醇水溶液a的体积浓度相同；

（2）含量测定：将步骤（1）制备的待测样品注入高效液相色谱仪进行检测，获得待测样品的高效液相色谱图；将黄芩苷标准品用体积浓度0～100%乙醇水溶液配制成黄芩苷标准品溶液，取不同体积的黄芩苷标准品溶液与待测样品相同的条件下进行入高效液相色谱检测，获得黄芩苷标准品溶液的高效液相色谱图，以黄芩苷标准品溶液的高效液相色谱图中吸收峰的峰面积为横坐标，以黄芩苷准品溶液进样量为纵坐标制作黄芩苷标准曲线，按同样方法制作连翘苷标准曲线、靛玉红标准曲线和甘草酸铵标准曲线；根据待测样品的高效液相色谱图中相应吸收峰的峰面积及各个标准品的标准曲线计算待测样品中黄芩苷、连翘苷、靛玉红和甘草酸含量，其中甘草酸的重量=甘草酸铵重量/1.0207，相应换算得到清热灵颗粒中黄芩苷、连翘苷、靛玉红和甘草酸含量；高效液相色谱仪测试条件为：色谱柱以苯基键合硅胶为填充剂，以体积浓度0.5%冰乙酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B进行梯度洗脱，梯度洗脱条件为0～20min时流动相A的体积分数为80～72%，20～35min时流动相A的体积分数为72～57%，35～50min时流动相A的体积分数为57%，DAD紫外检测器，分别同时在280nm、277nm、289nm和252nm处检测吸收峰。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（1）中，所述乙醇水溶液a为体积浓度50%乙醇水溶液或70%乙醇水溶液，乙醇水溶液b为体积浓度50%乙醇水溶液或70%乙醇水溶液，乙醇水溶液b与乙醇水溶液a的体积浓度相同。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（1），超声处理时间为20～30分钟。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（1）中，混合液a或混合液b的质量以清热灵颗粒的质量计为5～15mL/g。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（2）中，填充剂的粒径为5μm。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（2）中，洗脱剂的流速为1.0ml/min。