[发明专利]一种艾叶的乙酸乙酯提取物及其制备、检测方法和用途

说明书

[技术领域]

本发明涉及艾叶提取物、方法和应用，具体涉及一种艾叶的乙酸乙酯提取物及其制备、检测方法和用途。

[背景技术]

艾叶为菊科植物艾Artemisia argyi Lévl.et Vant.的干燥叶。具有温经止血，散寒止痛的功效，临床用于吐血、衄血、少腹冷痛、经寒不调、宫冷不孕、外用治皮肤瘙痒。主要含挥发油、黄酮类、三萜类、鞣质等成分。具有止血、抗菌抗病毒、抗肿瘤、清除自由基、镇痛等多种生理活性。

国内发明200810052604.5公开了用乙酸乙酯和乙醇混合物作为溶剂对艾叶进行提取；提取液经过色谱柱层析得洗脱液用制备液相色谱梯度洗脱得到的洗脱液，流动相为水和乙腈，收集40.0分钟洗脱液得到有效组分。

国内发明201110131147.0公开了从艾叶中提取倍半萜内酯类化合物Chloroklotzchin的提取方法，首先用乙醇提取，经大孔吸附树脂、聚酰胺树脂和硅胶柱层析分离。最后利用乙醇重结晶，得到了高纯度的化合物。

国内发明201210117611.5公开了一种艾叶提取物，将艾叶用乙酸乙酯浸泡，然后回流，回流结束后固液分离，所得液体浓缩后，经干燥即得。用于制备抗乙肝病毒药物。

本方法较200810052604.5及201110131147.0制备时间短、方法操作简单。其主要抗肿瘤成分为黄酮类和甾醇类，200810052604.5及201110131147.0抗肿瘤成分为挥发油类成分。201210117611.5为抗乙肝病毒药物，此发明只做颜色反应并未确定其具体成分。

[发明内容]

为了提取一种能够治疗肿瘤的艾叶有效成分，本发明提供了一种艾叶的乙酸乙酯提取物及其制备、检测方法和用途。

为实现上述目的，设计一种艾叶的乙酸乙酯提取方法，包括以下步骤：

a.艾叶用石油醚浸泡18～36h，每100g艾叶需要300～800ml的石油醚，然后渗滤回收残渣；

b.所述的残渣用70～90%的乙醇提取浓缩，浓缩后的浓缩液相对于于乙醇的密度为1.15～1.20，

c.将所述的浓缩液用乙酸乙酯进行萃取，收集乙酸乙酯层的萃取液。

上述提取方法还具有如下优化的方案：

所述的步骤（b）中，乙醇提取的次数为2次，每次提取时间为2小时，合并2次提取液进行所述的浓缩。

所述的步骤（b）中，乙醇的浓度为80%。

步骤（a）中，所述的艾叶先经过粉碎，粉碎后的粒径为250～850μm。

步骤（a）中，所述的浸泡，需要的时间为24h。

一种用上述方法提取得到的艾叶乙酸乙酯提取物，主要成分为黄酮类和甾醇类。具体为芹菜素、棕矢车菊素、木犀草素、异泽兰黄素、β-谷甾醇和槲皮素。

一种药物制剂，由上述的姜黄的乙酸乙酯提取物和药学上可接受的载体组成。

所述的制剂为片剂、散剂、片剂、胶囊或口服液。

一种检测上述艾叶的乙酸乙酯提取物的方法，用超高效液相色谱-电喷雾串联质仪对所述艾叶提取物进行分析，以获得艾叶乙酸乙酯提取物的UPLC-Q-TOF-MS图谱，

a.质谱条件为：ESI离子源，正离子模式检测；雾化器N2压力为50psi；干燥气N2流速为15L/min；质量扫描范围50～1200；自动3级质谱；

b.色谱分析条件为：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC^TM BEH C18Column(50mm×2.1mm.i d.,1.7μm)；二元梯度洗脱，A相为0.1%甲酸水溶液；B相为乙腈，流速为0.3mL/min，梯度洗脱的程序如下：90%A相，逐渐减少A相比例，至14min时A相比例为0，保持2min，流速：0.3mL/min；进样量3μL。

本发明首次提供了艾叶提取物在制备肿瘤的药物中的应用，并且提供了应用超高效液相色谱-质谱联机分析技术及结果构建艾叶提取物指纹图谱的方法。该方法包括艾叶提取物的UPLC-MS分析条件。色谱峰的特征、色谱组分的质谱提供的化合物结果信息等。本发明公开的指纹图谱及其技术可用于艾叶的品种鉴别及艾叶提取物的质量监控。

[附图说明]

图1为艾叶UPLC-Q-TOF/MS正离子模式下总离子流图。

[具体实施方式]