[发明专利]一种诱导心肌细胞凋亡的β1肾上腺素受体单克隆抗体无效
申请号: | 201310687137.4 | 申请日: | 2013-12-16 |
公开(公告)号: | CN103626873A | 公开(公告)日: | 2014-03-12 |
发明(设计)人: | 刘慧荣;杜芸辉;李笑;张苏丽;商建宇;马新亮 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学 |
主分类号: | C07K16/28 | 分类号: | C07K16/28 |
代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人: | 丁香兰;庞东成 |
地址: | 100069 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 诱导 心肌 细胞 肾上腺素 受体 单克隆抗体 | ||
1.一种β1-AA单克隆抗体,所述单克隆抗体利用以下两条多肽作为免疫原产生,
多肽1:序列与HWWRAESDEARRCYNDPKCCDFVTNRC同一性为85%至100%的多肽;
多肽2:序列与CHWWRAES DEARR同一性为85%至100%的多肽。
2.如权利要求1所述的β1-AA单克隆抗体,所述抗体通过杂交瘤融合方法制备。
3.如权利要求2所述的β1-AA单克隆抗体,所述杂交瘤融合方法包括以下步骤:
1)将多肽1和多肽2分别偶联至载体蛋白KLH、BSA作为免疫原;
2)使用步骤1)获得的两种免疫原分别免疫多只小鼠,制备多抗血清;
3)验证多抗血清的生物活性;
4)选择其中多抗血清滴度最高的1至2只小鼠,分别取脾细胞进行融合,制备单克隆杂交瘤细胞株;
5)对所获得的杂交瘤细胞通过ELISA方法进行筛选,挑选出1~5株高亲和力的特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株,并将其扩大培养;
6)挑选的1株克隆,接种小鼠,收集腹水并Protein G纯化。
4.如权利要求1所述的β1-AA单克隆抗体,所述多克隆抗体的序列与权利要求3所述方法制备的抗体的序列具有85%至100%的序列同一性。
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