[发明专利]一种从雷公藤提取物中快速制备雷公藤红素化学对照品的方法

权利要求书

1.高效制备高纯的雷公藤红素化学对照品的方法，其特征在于：雷公藤药材经乙醇提取，乙酸乙酯萃取、硅胶柱层析、高效制备色谱分离和凝胶纯化，可获得纯度大于98%的雷公藤红素化学对照品。本发明步骤为：

1）提取与萃取：

雷公藤药材，经乙醇提取，浓缩干燥后得到的总浸膏用水分散，得到总悬浮液；再将总悬浮液用乙酸乙酯萃取，浓缩干燥得乙酸乙酯萃取部位；

2）硅胶柱层析分离：

将步骤1）中所得的乙酸乙酯萃取部位进行硅胶柱层析分离，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，洗脱液浓缩干燥得雷公藤红素组分；

3）制备高效液相色谱纯化：

将步骤2）中所得的雷公藤红素组分用甲醇溶解，微孔滤膜过滤，即为供试品；将供试品用反相高效制备色谱分离，以甲醇-水溶液为洗脱体系，紫外检测器监测，收集雷公藤红素的色谱峰，流份浓缩干燥后得到雷公藤红素粗产物；

4）凝胶纯化

将步骤3）中所得的雷公藤红素粗产物用甲醇溶解，经甲醇凝胶柱纯化，得到纯度大于98%雷公藤红素对照品。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1）中提取时乙醇溶液的体积浓度为80%-100%。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1）中分散时用的水的体积为总浸膏的4-5倍，萃取用的乙酸乙酯与总悬浮液的体积相同。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2）中石油醚和乙酸乙酯的体积比例为4:1-1:1。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2）中采用薄层色谱做指导收集流份，展开剂为石油醚-乙酸乙酯，石油醚-乙酸乙酯体积比为2:1，收集Rf值为0.4-0.6的洗脱物。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3）中供试品溶液配置中，雷公藤红素组分浓度为50-150mg/mL。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3）中反相高效液相制备色谱的流动相中，甲醇的体积分数为80%-90%，用甲酸调节至pH=4。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3）反相高效液相制备中进样体积为5-10mL，流速控制在80-180mL/min。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3）反相高效液相制备中采用275-425nm监测。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤4）纯化用的凝胶为Sephadex LH-20。