[发明专利]一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法有效
申请号: | 201310694077.9 | 申请日: | 2013-12-18 |
公开(公告)号: | CN103694374A | 公开(公告)日: | 2014-04-02 |
发明(设计)人: | 任宪君;孙来娣;张秋艳 | 申请(专利权)人: | 青岛福创环境科技有限公司 |
主分类号: | C08B37/12 | 分类号: | C08B37/12;C08B37/00;C07K1/30 |
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地址: | 266000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 江蓠 原料 提取 琼脂 多糖 蛋白质 方法 | ||
1.一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)江蓠生物酶法预处理:将江蓠剪碎,用万能粉碎机打成粉末状,按原料重量加入1:8~1:14的水,室温浸泡使之充分溶胀,然后置于40~65℃水浴中,调节浸泡液pH值为3.5~6.5,加入0.05~0.5%的纤维素酶,反应5~8 h;然后在上述同样温度下,将体系pH值调为8~10,加入0.01~0.2%的复合蛋白酶,反应1~4 h,酶解结束后,离心分离,得到酶解 液和酶解残渣,江蓠渣用水清洗两遍,清洗液合并留作下批次浸泡使用;
(2)蛋白质的提取:江蓠酶解液升温到90℃保温10~20 min,进行灭酶活处理,然后减压浓缩酶解液,使其中的蛋白质含量达到2~5%,然后用稀盐酸调节至蛋白质等电点(pH=4.5~5.5),静置4 h以上,使蛋白质充分析出,离心收集沉淀物,40~60℃减压真空干燥得到蛋白质;
(3)岩藻多糖的提取:提取蛋白质后的酶解液,用饱和氧化钙溶液调pH值为6.5~9,再用2~3倍体积95%的乙醇进行醇沉,离心或过滤出沉淀,沉淀再用无水乙醇2次脱水,40~60℃烘干得到岩藻多糖;
(4)琼脂的提取:残渣进行漂白处理,然后迅速用水清洗残渣至中性,然后加入2倍体积的水,置于90℃水浴保温1 h,趁热过滤,滤渣再加入1倍体积的水进行二次煮胶,合并两次胶液,自然冷却凝固,将凝固后的凝胶放入冰箱中冷冻24 h以上,然后室温解冻,用清水漂洗琼胶除去杂质,挤干,烘干得到琼脂。
2.根据权利要求1所述的一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法,其特征在于,所述步骤(1)中纤维素酶的添加量优选为0.2%,复合蛋白酶的添加量优选为0.1%。
3.根据权利要求1所述的一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法,其特征在于,所述步骤(1)中水浴加热温度优选为55℃,调节浸泡液pH值为6。
4.根据权利要求1所述的一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法,其特征在于,所述步骤(2)中用稀盐酸调节至蛋白质等电点优选为pH=5。
5.根据权利要求1所述的一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法,其特征在于,所述步骤(3)中所用乙醇均重复回收利用。
6.根据权利要求1所述的一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法,其特征在于,所述步骤(3)中岩藻多糖的提取率为8%~10%,醇沉物中岩藻多糖含量在40%以上。
7.根据权利要求1所述的一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法,其特征在于,所述步骤(4)中漂白处理为:向酶解得到的江蓠渣中加入2~4倍体积的水,用盐酸调节pH值为2~4,加入NaClO使其中的有效氯浓度在0.05~0.3%,室温漂白处理3~15 min。
8.根据权利要求1所述的一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法,其特征在于,所述步骤(4)中琼脂提取率为27~28%。
9.根据权利要求1所述的一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法,其特征在于,所述步骤(4)中于40~60℃烘箱中烘干得到干燥琼脂。
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