[发明专利]一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法

说明书

技术领域

本发明属于海洋资源深加工与综合利用领域，具体涉及一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法。

背景技术

岩藻多糖（Fucoidin），是一种独特的结合有硫酸基团的水溶性多糖，也称褐藻多糖硫酸酯、褐藻糖胶，它是1913年由Kylin首先从掌状海带中提取出来的，主要存在于多种褐藻和一些海洋无脊椎动物中。近年来，由于海藻资源逐年增多，国内外学者对岩藻聚糖的提取、组成以及生理活性等方面进行了大量的研究。研究表明岩藻聚糖不仅具有抗病毒，防辐射，降血脂等多种生理活性，还可作为抗氧化营养素，用于预防氧化应激引起的疾病，能清除自由基、各种氧化物及致癌因子，促进人体健康，目前已经是海洋药物研究的热点之一。

琼脂，学名琼胶，又名洋菜、冻粉、琼胶、燕菜精、洋粉、寒天、大菜丝，是植物胶的一种，是由麒麟菜、石花菜或江篱（属红藻）经加热至溶化后，加以冷却凝固而成的海藻精华，为无色、无固定形状的固体，溶于热水。琼脂含有丰富的膳食纤维（含量为80.9%），蛋白质含量高，热量低，具有排毒养颜、泻火、润肠、降血压、降血糖和防癌作用，在食品工业中应用广泛，亦常用作细菌培养基。

江蓠体内充满藻胶，含胶达30%以上，是制造琼胶的重要原料之一，广泛应用于工、农、医业，作为细菌、微生物的培养基。沿海群众用其胶煮凉粉食用，也直接炒食。煮水加糖服用，具有清凉、解肠热、养胃滋阴的功效。

目前国内已有从江蓠中提取琼脂、岩藻多糖等单一产品的相关研究与产业化实施案例，例如，专利200810029075.7超声酸提江蓠多糖硫酸酯的方法，专利200910001265.2江蓠多糖的制备方法，但将江蓠中的绝大部分有效成分综合利用的相关报道却甚少；此外，现有琼脂和岩藻多糖的提取工艺还沿承传统工艺，不仅未充分利用海藻原料资源，还给环境污染、能源消耗带来巨大压力。

发明内容

本发明的目的是为了克服上述现有技术存在的不足，提供一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法，本发明利用生物酶解技术将江蓠中的有效成分充分提取分离，这对实现海产资源高值化综合利用、生产过程节能减耗具有重要意义。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种以江蓠为原料酶法提取琼脂、岩藻多糖和蛋白质的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）江蓠生物酶法预处理：将江蓠剪碎，用万能粉碎机打成粉末状，按原料重量加入1:8～1:14的水，室温浸泡使之充分溶胀，然后置于40～65℃水浴中，调节浸泡液pH值为3.5～6.5，加入0.05～0.5%的纤维素酶，反应5～8 h；然后在上述同样温度下，将体系pH值调为8～10，加入0.01～0.2%的复合蛋白酶，反应1～4 h，酶解结束后，离心分离，得到酶解液和酶解残渣，江蓠渣用水清洗两遍，清洗液合并留作下批次浸泡使用；

（2）蛋白质的提取：江蓠酶解液升温到90℃保温10~20 min，进行灭酶活处理，然后减压浓缩酶解液，使其中的蛋白质含量达到2～5%，然后用稀盐酸调节至蛋白质等电点（pH=4.5～5.5），静置4 h以上，使蛋白质充分析出，离心收集沉淀物，40～60℃减压真空干燥得到蛋白质；

（3）岩藻多糖的提取：提取蛋白质后的酶解液，用饱和氧化钙溶液调pH值为6.5～9，再用2～3倍体积95%的乙醇进行醇沉，离心或过滤出沉淀，沉淀再用无水乙醇2次脱水，40～60℃烘干得到岩藻多糖；

（4）琼脂的提取：残渣进行漂白处理，然后迅速用水清洗残渣至中性，然后加入2倍体积的水，置于90℃水浴保温1 h，趁热过滤，滤渣再加入1倍体积的水进行二次煮胶，合并两次胶液，自然冷却凝固，将凝固后的凝胶放入冰箱中冷冻24 h以上，然后室温解冻，用清水漂洗琼胶除去杂质，挤干，烘干得到琼脂。

上述步骤（1）中纤维素酶的添加量优选为0.2%，复合蛋白酶的添加量优选为0.1%。

上述步骤（1）中中水浴加热温度优选为55℃，调节浸泡液pH值为6。

上述步骤（2）中用稀盐酸调节至蛋白质等电点优选为pH=5。

上述步骤（3）中所用乙醇均重复回收利用。

上述步骤（3）中岩藻多糖的提取率为8%～10%，醇沉物中岩藻多糖含量在40%以上。

上述步骤（4）中漂白处理为：向酶解得到的江蓠渣中加入2～4倍体积的水，用盐酸调节pH值为2～4，加入NaClO使其中的有效氯浓度在0.05～0.3%，室温漂白处理3～15 min。