[发明专利]犬瘟热病毒与犬副流感病毒双重RT-PCR检测及其专用引物有效
| 申请号： | 201310694619.2 | 申请日： | 2014-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN103667537A | 公开（公告）日： | 2014-03-26 |
| 发明（设计）人： | 王贵升;田夫林;王金宝;尹斐斐;陈静;徐鸿;李玉杰 | 申请（专利权）人： | 山东省动物疫病预防与控制中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 袁敬清 |
| 地址： | 250022 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 犬瘟热 病毒 流感病毒 双重 rt pcr 检测 及其 专用 引物 | ||
1.一种专用引物，其特征在于，包括引物对A和/或引物对B；
所述引物对A包括引物1和引物2，
所述引物对B包括引物3和引物4，
所述引物1、引物2、引物3、引物4的核苷酸序列分别为序列表中的序列1、序列2、序列3、序列4。
2.根据权利要求1所述的专用引物，其特征在于，所述引物对A能检测检测CDV，所述引物对B能检测CPIV。
3.根据权利要求1或2所述的专用引物，其特征在于，为引物对A；或者为引物对B。
4.根据权利要求1或2所述的专用引物，其特征在于，由引物对A和引物对B组成。
5.一种RT-PCR试剂，其特征在于，包含权利要求1-4中任意一项所述的专用引物。
6.根据权利要求5所述的RT-PCR试剂，其特征在于，还包含dNTP、DNA聚合酶、M-MLV、RNase Inhibitor和PCR缓冲液。
7.根据权利要求5或6所述的RT-PCR试剂，其特征在于RT-PCR试剂中，
所述专用引物中各引物的终浓度均为0.4μM；
所述dNTP的终浓度均为0.4mM；
所述DNA聚合酶的终浓度均0.05 U/μL;
所述M-MLV的终浓度为2U/μL；
所述RNase Inhibitor的终浓度为3.2U/μL；
所述终浓度是指在25μL RT-PCR反应体系中的最终浓度。
8.一种RT-PCR试剂盒，其特征在于，含有权利要求5-7中任意一项所述的RT-PCR试剂。
9.一种检测或辅助检测待测样本病毒的方法，包括如下步骤：
用权利要求1-3中任意一项所述的专用引物、权利要求4-6中任意一项所述的RT-PCR试剂或权利要求7所述的RT-PCR试剂盒中的引物对A和引物对B对待测样本进行RT-PCR扩增，得到RT-PCR扩增产物；用琼脂糖凝胶电泳或测序法检测扩增产物；
扩增产物大小为593bp，则样本中含有或候选含有犬瘟热病毒；
扩增产物大小为1530bp，则样本中含有或候选含有犬副流感病毒；
本方法用于非诊断和治疗目的。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，RT-PCR扩增的退火温度为53℃-58℃。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东省动物疫病预防与控制中心，未经山东省动物疫病预防与控制中心许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310694619.2/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
