[发明专利]一种原始生殖细胞的爬片方法有效
| 申请号： | 201310702097.6 | 申请日： | 2013-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN103674653A | 公开（公告）日： | 2014-03-26 |
| 发明（设计）人： | 于福先;潘建治;朱志伟;陈晓宇;黄菁 | 申请（专利权）人： | 浙江省农业科学院 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28;G01N1/30 |
| 代理公司： | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人： | 吴秉中 |
| 地址： | 310021 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 原始 生殖细胞 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种原始生殖细胞的爬片方法，其特征在于包括以下步骤：
1）对原始生殖细胞进行纯化；
2）对纯化后的原始生殖细胞采用PBS洗涤3次，离心收集细胞；
3）显微镜下拣取100～200个细胞置于载玻片上的PBS液滴中洗涤1次；
4）拣取细胞，置于载玻片上浓度4%的多聚甲醛溶液中洗涤1次；
5）拣取细胞，置于载玻片上的浓度4%的多聚甲醛液滴中固定10～30分钟；
6）吸除浓度4%的多聚甲醛，细胞固定的同时完成细胞的爬片。
2.如权利要求1所述的一种原始生殖细胞的爬片方法，其特征在于所述的原始生殖细胞为禽类及哺乳动物类的PGCs细胞。
3.如权利要求1所述的一种原始生殖细胞的爬片方法，其特征在于所述的步骤1）中PGCs细胞采用Nycodenz密度梯度离心、Percoll密度梯度离心或流式分选方法进行纯化。
4.如权利要求2所述的一种原始生殖细胞的爬片方法，其特征在于所述的步骤2）中离心条件200 g，5分钟。
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