[发明专利]从野生龙胆草里提取龙胆苦甙的新型工艺方法

权利要求书

1.一种利用超临界CO₂流体萃取、超滤分离、大孔树脂吸附再结合柱层析纯化龙胆苦甙的新方法，其步骤如下：

(1)将龙胆草切断3～6cm，加入到CO₂超临界萃取器中，用乙醇作为夹带剂，萃取压力为20MPa～40MPa，温度为50℃～60℃，萃取时间100min～140min，得萃取物；

(2)将经步骤(1)处理的龙胆苦甙萃取液用盐酸调其pH值为3.0～4.0，静置、抽滤、减压浓缩得龙胆苦甙粗提物；

(3)采用一定截留分子量的超滤膜分离，膜操作压力为0.2-0.3MPa，截留率为90-95％；

(4)采用大孔吸附树脂吸附纯化龙胆草甙、树脂型号为AB-8、D4006或NKA-II中的一种，在径高比1∶6-1∶8，体积流量2-4BV／h，流速为3-5BV／h下进行吸附；

(5)用体积分数70-80％乙醇，体积流量2-3BV／h条件下进行解析，用薄层色谱法跟踪检测，收集各阶段洗脱液；

(6)回收乙醇，将龙胆苦甙各阶段洗脱液浓缩，得苦甙半成品，其纯度为75％以上；

(7)粗粉溶于乙酸乙酯加适量硅胶搅拌，干法上样，上200-300目硅胶柱层析对提取物进行再次纯化，用水洗掉杂质，再用70-90％浓度的乙醇洗脱，洗脱液用薄层层析跟踪监测；

(8)回收乙醇，收集洗脱液浓缩，冷冻干燥，得到纯度为98％以上龙胆苦甙成品。

2.根据权利要求1所述的一种利用超临界CO₂流体萃取、超滤分离、大孔树脂吸附再结合柱层析纯化龙胆苦甙的新方法，其特征是：在所述的步骤(1)中，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为1％。

3.根据权利要求2所述的一种利用超临界CO₂流体萃取、超滤分离、大孔树脂吸附再结合柱层析纯化龙胆苦甙的新方法，其特征是：在所述的步骤(3)中，超滤膜截留分子量为1000-5000。

4.根据权利要求3所述的一种利用超临界CO₂流体萃取、超滤分离、大孔树脂吸附再结合柱层析纯化龙胆苦甙的新方法，其特征是：在所述的步骤(4)中，大孔树脂吸附时，调整吸附pH值为6-7。