[发明专利]一种启动子及表达外源蛋白的重组表达系统有效
申请号: | 201310717119.6 | 申请日: | 2013-12-23 |
公开(公告)号: | CN103757019A | 公开(公告)日: | 2014-04-30 |
发明(设计)人: | 王华明;黄亦钧;赵倩;许韡;张慧丹;刘士成 | 申请(专利权)人: | 青岛蔚蓝生物集团有限公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/80;C12R1/645 |
代理公司: | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人: | 曾庆国 |
地址: | 266061 山东省青岛市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 启动子 表达 蛋白 重组 系统 | ||
1.一种启动子,其特征在于,所述启动子包含有:
a)核苷酸序列为SEQ ID NO:1的启动子;
b)与a)中的启动子序列相似性不低于90%,且具有a)中启动子功能的启动子。
2.一种表达载体,包括有启动子和终止子,其特征在于所述的启动子为权利要求1所述的启动子。
3.如权利要求2所述的表达载体,其特征在于所述的终止子的核苷酸序列为SEQ ID NO:2。
4.如权利要求2或3所述的表达载体,其特征在于所述的表达载体上还包含有筛选标记。
5.如权利要求4所述的表达载体,其特征在于所述的筛选标记为硫胺素抗性基因ptrA。
6.一种外源蛋白表达系统,包含有宿主和表达载体,其特征在于,所述的宿主为柄篮状菌,表达载体为权利要求2所述的表达载体。
7.如权利要求6所述的外源蛋白表达系统,其特征在于,所述的外源蛋白表达系统的筛选标记为硫胺素抗性基因。
8.如权利要求6所述的外源蛋白表达系统,其特征在于,所述的柄篮状菌为柄篮状菌VL-1,保藏编号为CCTCC NO:M2013679。
9.一种表达外源蛋白的方法,包括如下步骤:
1)外源基因的克隆;
2)利用权利要求2所述的表达载体,构建携带步骤1)外源基因的重组表达载体;
3)将重组表达载体转化柄篮状菌,获得重组表达外源蛋白的重组菌株。
10.如权利要求9所述的方法,其特征在于所述的步骤3)中的转化柄篮状菌,所述的转化为电击转化法、农杆菌介导转化法或原生质体转化法中的任意一种。
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