[发明专利]一种精氨酸精制工艺有效
申请号: | 201310721132.9 | 申请日: | 2013-12-24 |
公开(公告)号: | CN103695489A | 公开(公告)日: | 2014-04-02 |
发明(设计)人: | 高法民;高树营;王威 | 申请(专利权)人: | 山东民强生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12P13/10 | 分类号: | C12P13/10;C12R1/13 |
代理公司: | 济南舜源专利事务所有限公司 37205 | 代理人: | 宋玉霞 |
地址: | 256600 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 精氨酸 精制 工艺 | ||
技术领域
本发明涉及氨基酸生产技术领域,特别是涉及一种精氨酸精制工艺。
背景技术
精氨酸在医药、营养保健、食品等领域应用广泛,需求量大,被称之为氨基酸中最重要的品种之一。L-精氨酸是生物体尿素循环的重要中间代谢产物,所有的机体组织都利用L- 精氨酸合成细胞浆蛋白和核蛋白。在生理活性方面,除了与生长激素、胰岛素、胰高血糖素等激素诱导有关外,近年来,又作为血管舒张因子而引起关注,有望成为营养疗法的新材料。由于L- 精氨酸不仅拥有重要的科学研究、实际生产及应用价值,同时L- 精氨酸在生理功能重要性的作用,而且现在国内传统生产方法依旧污染严重、产能产值较低,因此,经国务院和全国人大代表批准,发酵法生产精氨酸列入国家“十一五”重点攻关科技项目。
目前国内主要依靠蛋白质水解法来生产精氨酸,该法操作费时、收率低,工艺稳定性不好且环境污染严重,不适于大规模生产。国外特别是欧盟国家十分强调非动物来源性(non-animal),使得毛发水解精氨酸产品受到很大发展限制。因此,建立我国发酵法生产精氨酸工业十分紧迫,也有良好发展前景。
精氨酸提取主要有两种生产工艺:即蛋白质水解提取工艺;生物发酵工艺。生物发酵工艺中发酵液中含有大量的有机和无机杂质,传统的后提取处理工艺对产品质量没有保障,而且费工费时。现有技术提取时采用了板框过滤,时间长,收率低,损失大。
发明内容
本发明的目的就是针对上述存在的缺陷而提供一种精氨酸精制工艺。本提取工艺采用陶瓷膜代替传统的板框过滤,提高了滤液质量;采用膜分离技术代替传统的离子交换分离技术,提高了料液质量和透过,提高了产品质量;采用膜浓缩技术代替传统的减压浓缩技术,减少了对产品的破坏,降低了能耗,提高了产品质量。通过本发明制备方法,成品对于发酵液来说总收率能达到87%以上(相对于除去菌体的净精氨酸含量计算),成品一次合格率达到99.9%。
本发明的一种精氨酸精制工艺技术方案为,包括发酵液的制备和提取精制步骤,其中发酵液的制备采用黄色短杆菌MQA121。
MQA121菌株在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,邮编:100101,其保藏编号是:CGMCC No.8392,菌种的拉丁文名称是Brevibacterium fLavum,参据的微生物(株):MQA121,保藏日期是2013年10月25日。
本发明所述的MQA121菌株特征为:产酸能力强、糖酸转化率高、性能稳定。
发酵液的制备包括下述的步骤:
(1)斜面培养 :将MQA121菌种接入灭菌的斜面培养基,在26℃培养,20-28小时得到斜面菌种;
(2)摇瓶菌种:将培养好的斜面菌种接入摇瓶灭菌种子培养基26℃培养16-20小时得到摇瓶种子液;
(3)一级种子培养:将培养好的摇瓶种子液接入灭菌的一级种子培养基,26℃培养12-16小时得一级种液;
(4)二级种子培养:将培养好的一级种子液接入灭菌过的二级种子培养基26℃培养3-5小时得二级种子液;
(5)将培养好的二级种子液接种到灭菌的发酵培养基中,发酵过程补加按重量百分比的5%葡萄糖和玉米浆3.5-5.0%、(NH4)2SO42.5-4.0%、KH2PO40.3-0.6%、K2HPO4·3H2O0.3-0.6%,通入无菌风,采用氨水控制pH值7.2,在26℃条件下,经过66-72小时培养得到含精氨酸产品的发酵液。
步骤(1)中斜面培养基包括按重量百分比的:葡萄糖2.5-5.0%、(NH4)2SO42.0-4.5%、KH2PO40.3-0.5%、K2HPO4·3H2O0.3-0.6%、MgSO4·7H2O0.05-0.10%、FeSO4·7H2O 0.002-0.006%、MnSO4·H2O0.002-0.006%,琼脂粉2.0%,pH7.0~7.6。
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